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FITC-Neuropeptide S,荧光素标记神经肽的合成步骤
发布时间:2025-09-09     作者:axc   分享到:

FITC-Neuropeptide S,荧光素标记神经肽的合成步骤

FITC-Neuropeptide S是一种将异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)共价标记至神经肽Neuropeptide S(NPS)的小分子荧光衍生物。Neuropeptide S是一种由20个氨基酸组成的内源性神经肽,具有独特的受体结合特性,其活性序列通常以特定的N端或赖氨酸残基为标记位点。通过FITC标记,NPS获得绿色荧光(激发约495 nm,发射约520 nm),可用于体外或细胞体系的可视化示踪、受体结合分析及动力学研究。FITC-Neuropeptide S结合了荧光示踪功能与神经肽的生物活性,是神经科学及药物递送研究的重要工具。

FITC-Neuropeptide S的合成步骤主要包括神经肽固相合成、荧光标记以及纯化和表征三个关键阶段:

Neuropeptide S的固相合成(SPPS)

利用Fmoc(9-芴甲氧羰基)策略,在固相载体(如Rink Amide或Wang树脂)上逐步延伸肽链。

每步通过Fmoc保护的氨基酸与活化剂(如HBTU、HATU或DIC/HOBt)缩合,形成肽键,同时采用碱性条件(如哌啶)脱去Fmoc保护基。

完成整个肽链延伸后,通过酸性条件(如TFA)从树脂上切割肽链,同时去除侧链保护基团,得到带自由氨基的Neuropeptide S。

荧光标记(FITC偶联)

将干燥的NPS溶解于适宜缓冲液(如0.1 M碳酸氢钠缓冲液,pH 8.0–9.0),保证N端或赖氨酸侧链氨基未质子化以维持亲核活性。

FITC溶于少量DMSO或碳酸盐缓冲液中,避光保护。

缓慢加入FITC溶液,使FITC的异硫氰酸基团(–N=C=S)与肽氨基发生亲核加成反应,生成稳定的硫脲键(–NH–C(=S)–NH–),实现共价偶联。

反应在室温或低温条件下进行2–12小时,避免荧光团降解,同时保证标记效率。

终止反应与纯化

通过加入甘氨酸或氨水终止多余FITC的反应。

利用高效液相色谱(HPLC)进行纯化,去除未反应的FITC、多肽杂质及副产物。

纯化后的FITC-Neuropeptide S通过质谱(MS)、HPLC及紫外-可见光光谱确认分子量、纯度及荧光特性,保证产物的功能完整性。

在合成过程中,需要严格控制反应条件:pH维持在弱碱性以保证氨基活性,避免多肽结构失活;温度与光照控制以防止荧光团降解;FITC与NPS摩尔比优化以获得单一标记,同时保留肽的生物活性。通过合理选择标记位点(N端或赖氨酸残基),可确保肽的受体结合能力不受影响。

终得到的FITC-Neuropeptide S具有稳定的绿色荧光和可控标记密度,可用于神经肽受体结合分析、细胞内递送示踪、荧光成像及药物筛选等研究。其硫脲共价键保证了标记稳定性,而保留的神经肽序列保证了特异性生物活性,使其成为神经科学和生物化学实验中高效可靠的荧光工具。

产品名称:FITC-Neuropeptide S,荧光素标记神经肽

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

FITC-Neuropeptide S

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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