产品名称：生物素-4-荧光素

英文名称：Biotin-4-Fluorescein

Biotin-4-Fluorescein（生物素 - 4 - 荧光素）是由生物素（Biotin）与荧光素通过特定连接臂（4 位修饰）偶联形成的双功能分子，核心功能是同时实现生物分子的特异性结合与荧光示踪，广泛用于免疫分析、细胞生物学研究及生物分子分离纯化。分子特性上，该分子兼具两种组分的优势：荧光素赋予其强荧光性能 ——494nm 激发、518nm 发射，荧光量子产率高（约 0.92），抗光漂白能力强，可通过荧光检测手段快速定位目标分子；生物素则具有对亲和素（Avidin）、链霉亲和素（Streptavidin）的极高亲和力（解离常数 Kd≈10⁻¹⁵mol/L），结合过程快速、稳定，不受 pH（4.0-9.0）、温度（4-37℃）及常见离子影响，可实现目标分子的特异性捕获与分离；连接臂（4 位修饰）的引入避免了生物素与荧光素之间的空间位阻，确保两者功能互不干扰。

制备过程需兼顾双组分活性与偶联稳定性：首先分别纯化高纯度生物素与荧光素，确保生物素纯度≥99%（避免杂质影响亲和结合）、荧光素纯度≥98%（保证荧光性能）；随后选择生物素的羧基位点与荧光素的氨基位点（或反之），通过酰胺缩合反应，在 4 位连接臂的介导下实现偶联。反应中需控制生物素与荧光素的摩尔比（1:1），避免多偶联产物生成；使用偶联剂（如 EDC/DMAP）提高反应效率，反应体系 pH 控制在 7.5-8.5（确保双组分活性），全程避光操作（防止荧光素光解）；反应后采用制备型 HPLC（流动相为甲醇 / 水）纯化，去除未反应的生物素与荧光素，并用质谱（MS）和核磁共振（¹H NMR）验证分子结构 ——¹H NMR 中需同时出现生物素的噻吩环特征峰（δ 4.3-4.5 ppm）与荧光素的苯环特征峰（δ 7.0-7.8 ppm），同时通过紫外分光光度计测定偶联效率（A494/A280 比值≥0.8）。

应用场景集中在 “结合 - 示踪” 双功能需求领域：在免疫荧光检测中，可作为检测试剂用于目标抗原的定位与定量 —— 例如先将生物素标记的一抗与样本中的抗原结合，再加入 Biotin-4-Fluorescein 与一抗的生物素结合，同时加入链霉亲和素包被的磁珠捕获复合物，通过荧光检测既实现目标分子的分离，又可通过荧光强度定量抗原含量，提高检测灵敏度与准确性；在细胞生物学研究中，可标记细胞表面的生物素化受体（如表皮生长因子受体 EGFR），通过荧光显微镜观察受体的分布与内化过程，同时利用链霉亲和素磁珠分离受体复合物，分析受体结合的下游信号蛋白；在生物分子分离纯化中，可用于目标蛋白的 “荧光示踪纯化”—— 将 Biotin-4-Fluorescein 与目标蛋白结合后，通过亲和层析柱（链霉亲和素包被）分离，同时通过柱后荧光检测实时监测目标蛋白的洗脱过程，避免收集遗漏或杂质混入；此外，还可用于活体成像研究，将其与肿瘤靶向载体（如抗体、肽）结合，通过荧光成像观察载体在动物体内的肿瘤富集过程，同时利用生物素 - 亲和素系统实现肿瘤部位的药物靶向递送，为肿瘤诊断与治疗提供一体化工具。

产地：西安

规格：50mg 100mg 500mg

纯度：95%

状态：固体/粉末

储藏条件：冷藏

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的高科技企业，可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等，可以满足不同客户的定制需求。

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小编：HLL 2025年9月9日