英文名称:5-FAM-IYSGDYYR-NH2
中文名称:5-羧基荧光素标记的异亮氨酸-多肽
5-FAM-IYSGDYYR-NH2是一种结合荧光标记与多肽功能的复合分子,其核心由荧光基团5-羧基荧光素(5-FAM)与九肽序列(IYSGDYYR)通过化学键连接而成,并在C端以酰胺基团(-NH2)修饰。5-FAM作为经典的荧光染料,具有激发波长495 nm、发射波长520 nm的绿色荧光特性,其光稳定性强、量子产率高,且水溶性良好,适用于多种生物检测环境。该多肽序列中的酪氨酸(Y)和天冬氨酸(D)残基因侧链含有酚羟基和羧基,可能参与特定酶或受体的识别与结合,赋予分子生物靶向性。例如,在酶活性研究中,标记肽可作为底物,通过荧光强度变化实时监测酶的催化过程;在蛋白质相互作用分析中,其荧光信号可被用于追踪分子间的动态结合与解离。
该物质的合成需分步进行:首先通过固相合成法制备多肽序列,再通过酰胺键将5-FAM偶联至多肽N端。过程中需严格控制反应条件,如pH值、温度及反应时间,以避免荧光淬灭或多肽结构破坏。纯化后需通过质谱与高效液相色谱(HPLC)验证分子量与纯度,确保其符合实验要求。储存时需避光、低温(如-20℃),并分装保存以减少反复冻融对荧光稳定性的影响。
其应用场景广泛,涵盖分子生物学、细胞生物学及药物开发等领域。例如,在细胞成像实验中,标记肽可通过荧光显微镜观察在细胞内的定位与迁移;在流式细胞术中,其荧光信号可用于细胞分选或定量分析。此外,该物质还可作为探针,结合荧光共振能量转移(FRET)技术,研究蛋白质构象变化或分子间相互作用,为生命科学基础研究提供重要工具。
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