Fluo-3 AM,钙离子荧光探针的反应特点
Fluo-3 AM(Fluo-3 acetoxymethyl ester)是一种应用于生物研究的钙离子荧光探针,主要用于检测细胞内钙离子浓度变化。Fluo-3本身是一种荧光染料,能够选择性结合Ca²⁺,其荧光强度随钙离子浓度变化而增强。为了实现细胞膜可渗透性,Fluo-3以其非性的AM酯形式(acetoxymethyl ester)应用,使其可以被活细胞摄取并在胞内水解释放出活性Fluo-3,从而实现对细胞内游离Ca²⁺的可视化检测。
Fluo-3 AM的化学结构由荧光核心Fluo-3和两端的AM酯基组成。AM酯化修饰掩蔽了Fluo-3分子中的羧基负电荷,使分子呈中性并提高脂溶性,从而可以跨过细胞膜。在胞内,非特异性酯酶(如胞质内的羧酸酯酶)水解AM酯键,将Fluo-3 AM转化为带负电荷的Fluo-3活性形式,活性Fluo-3由于带有羧基而被困留在胞内。此过程既保证了探针在胞外不会提前激发荧光,又实现了细胞内钙离子的精准检测。
Fluo-3作为Ca²⁺荧光探针,其反应特点主要体现在高选择性、敏感性和动态响应性上。Fluo-3分子中的荧光基团在未结合Ca²⁺时几乎不发光(荧光猝灭状态),当Ca²⁺与Fluo-3的羧基配位结合时,分子构象发生改变,抑制了猝灭效应,使荧光强度增强。其激发波长约为488 nm,发射波长约为525 nm,可与常规荧光显微镜或流式细胞仪兼容,实现高分辨率的荧光成像与定量分析。
Fluo-3 AM的反应特点还包括可逆性和快速响应性。Fluo-3与Ca²⁺结合为可逆反应,能够实时反映细胞内Ca²⁺浓度的动态变化。在细胞信号传导、神经活动、肌肉收缩或药物刺激研究中,Fluo-3 AM可用于连续监测Ca²⁺瞬时波动,为研究钙依赖性生理过程提供可靠工具。
此外,Fluo-3 AM的生物化学特性和使用特点还包括高生物相容性和低。在适宜浓度下,Fluo-3 AM对大多数哺乳动物细胞无明显细胞,并能在胞内被酯酶有效水解,形成稳定的荧光探针。同时,其水溶性和脂溶性兼具的特性,使得在各种细胞类型及组织切片中均能有效渗透和成像。
在实验操作中,Fluo-3 AM的使用通常包括溶解于DMSO或带少量表面活性剂(如Pluronic F-127)的缓冲液中,以提高探针的均匀分布和细胞摄取效率。孵育一定时间后,探针被胞内酯酶水解释放为活性Fluo-3,随后可通过激光扫描共聚焦显微镜或流式细胞仪记录荧光信号变化,实现对Ca²⁺动态的测量。
综上所述,Fluo-3 AM作为一种钙离子荧光探针,其反应特点主要包括:通过AM酯实现细胞膜可渗透性;胞内酯酶水解释放活性Fluo-3;高选择性结合Ca²⁺导致荧光增强;反应可逆、动态响应快;激发波长和发射波长适合常规荧光成像;生物相容性良好,低且适用于细胞内钙信号研究。这些特点使Fluo-3 AM成为研究细胞信号转导、神经活动及药物作用机制的重要工具。
产品名称:Fluo-3 AM,钙离子荧光探针
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09