英文名称:FITC-Cyclo (-RGDfK)-Azido-PEG4
中文名称:异硫氰酸荧光素标记环状精氨酰标记多肽
FITC-Cyclo (-RGDfK)-Azido-PEG4是一种多功能荧光标记化合物,其核心结构为环状RGD五肽(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys),通过酰胺键闭环形成稳定构象,显著提升抗酶解能力。环状结构中的D-苯丙氨酸(D-Phe)通过空间位阻效应优化了与整合素受体的结合模式,而赖氨酸(Lys)残基则作为连接位点,其一端共价修饰异硫氰酸荧光素(FITC),另一端通过叠氮基团(Azido)与四聚乙二醇(PEG4)相连。FITC的激发/发射波长为495/520 nm,属于可见光区荧光团,适用于常规荧光显微镜及流式细胞术检测;PEG4的引入则通过增加分子柔韧性及水溶性,减少了非特异性吸附,同时叠氮基团为后续生物正交反应(如无铜点击化学)提供了活性位点。
该化合物的合成采用固相肽合成法,通过FMOC保护基策略逐步延伸肽链,环化反应在树脂上完成以避免副产物生成,最终经高效液相色谱(HPLC)纯化获得高纯度产品(>95%)。其分子量约为1,500 Da,在PBS缓冲液(pH 7.4)中溶解性良好,且FITC的荧光强度与肽浓度呈线性相关,便于定量分析。PEG4的修饰不仅降低了分子表面电荷密度,还通过空间屏蔽效应减少了与血清蛋白的非特异性结合,延长了其在生物样本中的稳定性。
在应用层面,FITC-Cyclo (-RGDfK)-Azido-PEG4可作为探针标记整合素相关分子,例如通过荧光共定位分析验证RGD序列与细胞表面受体的结合特异性;其叠氮基团还可与二苯并环辛炔(DBCO)修饰的分子发生无铜点击反应,实现荧光标记与功能化修饰的一步法偶联,为构建多功能生物探针提供了灵活平台。此外,该化合物在生物传感器开发中也有潜在应用,例如通过监测荧光信号变化实时追踪分子间相互作用动力学。
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