产品名称:5-异硫氰酸荧光素生物素
英文名称:5-FITC Biotin
CAS:134759-22-1
5 - 异硫氰酸荧光素生物素(5-FITC Biotin,CAS 号 134759-22-1)是一款将荧光检测与生物亲和识别功能完美结合的双功能分子探针,其分子结构由 5 - 异硫氰酸荧光素(5-FITC)、生物素(Biotin)及连接臂三部分组成,凭借 5-FITC 的荧光报告能力与生物素对亲和素(Avidin)/ 链霉亲和素(Streptavidin)的超强特异性结合能力,在生物分子分离纯化、免疫检测、活细胞成像等领域成为不可或缺的工具,其唯一 CAS 号确保了试剂身份的精准识别与实验应用的可靠性。
从核心功能组件来看,生物素(Biotin)是该探针实现生物亲和识别的关键。生物素与亲和素 / 链霉亲和素之间的相互作用是生物化学领域中已知亲和力最强的非共价相互作用之一,其解离常数(Kd)低至 10⁻¹⁵ M,远高于抗原与抗体的结合亲和力(Kd 通常为 10⁻⁹-10⁻¹¹ M),这种超强的结合力意味着两者能在极低浓度下快速、特异性结合,且结合后不易解离,即使在复杂的生物样本(如细胞裂解液、血清、组织匀浆)中,也能有效抵抗极端 pH、高盐浓度或变性剂的干扰,保持结合的稳定性。同时,生物素分子体积小(分子量约 244 Da),其与生物分子偶联后,几乎不会对生物分子的天然结构、生物活性及功能产生影响,这一特性使其特别适合用于标记抗体、抗原、多肽、核酸、酶等生物大分子,例如将 5-FITC Biotin 标记到抗体上,抗体仍能保持与抗原的特异性结合能力,同时兼具荧光信号与生物素的亲和识别能力。
5-FITC 基团则为该探针提供了高效的荧光报告功能,是实现可视化检测与定量分析的核心。5-FITC 的激发波长约为 494nm,发射波长约为 520nm,处于绿色荧光波段,这一波长范围不仅与主流荧光检测设备(如荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪、激光共聚焦显微镜)的 488nm 激发光源高度兼容,还能有效避开生物样本的自发荧光区域(多集中在 300-450nm),显著降低背景荧光干扰,提升检测的信噪比与特异性。此外,5-FITC 具有较高的荧光量子产率(约 0.92)与良好的光稳定性,即使在低标记效率或长时间光照条件下,也能产生稳定、可检测的荧光信号,满足高灵敏度检测与动态成像的需求,例如在单分子水平上追踪生物分子的运动轨迹,或在活细胞内长时间观察目标蛋白的分布变化。
连接臂的设计在 5-FITC Biotin 的功能实现中也扮演着重要角色。连接臂通常为直链烷基或聚乙二醇(PEG)链,其主要作用包括:一是避免空间位阻,连接臂能将 5-FITC 与生物素分子在空间上适当分离,防止两者因距离过近导致的相互作用(如荧光淬灭),同时也能避免生物素与亲和素 / 链霉亲和素结合时,5-FITC 基团对结合位点产生空间阻碍,确保亲和结合的高效性;二是调节分子溶解性,通过引入亲水性的连接臂(如 PEG 链),可提升探针整体的水溶性,减少其在水溶液或生理缓冲液中的聚集趋势,降低非特异性吸附,同时也能提升探针与生物分子偶联后的溶解性与分散性,保障实验效果。
在实际应用场景中,5-FITC Biotin 的双功能特性使其展现出广泛的应用价值。在生物分子分离纯化领域,基于生物素 - 亲和素的超强亲和作用,5-FITC Biotin 可用于目标生物分子的富集与纯化:例如将 5-FITC Biotin 标记到特异性抗体上,与含有目标抗原的细胞裂解液共孵育后,加入偶联有链霉亲和素的磁珠,抗体 - 抗原复合物会通过生物素与链霉亲和素的结合吸附到磁珠上,利用磁场即可快速分离出磁珠,实现目标抗原的高效纯化,而 5-FITC 的荧光信号可用于验证纯化产物的存在与纯度。在免疫检测领域,5-FITC Biotin 是构建荧光免疫检测体系的关键试剂,例如在夹心 ELISA(酶联免疫吸附实验)中,可将其作为检测抗体的标记物 —— 捕获抗体包被在微孔板上,与样本中的目标抗原结合后,加入 5-FITC Biotin 标记的检测抗体,形成 “捕获抗体 - 抗原 - 检测抗体” 复合物,再通过荧光酶标仪检测 5-FITC 的荧光强度,实现对目标抗原的定量分析;此外,它还可用于免疫印迹(Western Blot)的荧光检测,通过标记二抗,替代传统的酶标记二抗,不仅能简化检测流程(无需底物反应),还能实现多通道检测与定量分析。在活细胞成像领域,5-FITC Biotin 可用于细胞内生物分子的定位与动态追踪:例如将其标记到细胞穿透肽上,通过肽介导的细胞内递送进入细胞后,与细胞内的目标蛋白(需预先偶联亲和素)结合,利用荧光显微镜即可观察目标蛋白的亚细胞定位与运动情况;在细胞间通讯研究中,标记后的生物素分子还可通过细胞间的物质交换传递,借助 5-FITC 的荧光信号监测细胞间的相互作用。
此外,5-FITC Biotin 还具有良好的化学稳定性与反应适用性。其分子结构中的活性基团(如与生物分子偶联的基团)在常规储存条件下(避光、低温、干燥)能保持稳定,不易分解;同时,它可与多种生物分子(如蛋白质、多肽、核酸、糖脂)通过常规的化学偶联方法(如酰胺化反应、巯基反应)实现标记,反应条件温和,对生物分子活性影响小。其 CAS 号 134759-22-1 的唯一性,也为科研人员在试剂采购、实验重复、结果发表过程中提供了可靠的化学身份依据,确保实验结果的可重复性与科学性。
产地:西安
规格:50mg 100mg 500mg
纯度:95%
状态:固体/粉末
储藏条件:冷藏
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。
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小编:HLL 2025年9月11日