CY3-saffron,花菁染料CY3标记藏红花的表征方法
CY3-saffron 是通过花菁染料 CY3 与藏红花提取物中主要活性成分(如 crocin 或 crocetin)的羟基或羧基基团进行化学修饰而得到的荧光标记复合物。藏红花是一类含有多糖苷化类胡萝卜素的产物,分子中含有多个 –OH 和 –COOH 基团,为荧光标记提供了丰富的反应位点。CY3 与藏红花成分结合后,不仅赋予产物荧光信号,还可用于追踪其在细胞或材料体系中的分布与行为。
在合成方面,常用的方式是利用 CY3-NHS ester 与藏红花中 crocin 的伯胺或羟基经过活化偶联反应生成酯键或酰胺键。此外,CY3-isothiocyanate 也可与氨基位点反应形成硫脲键。为避免染料过度修饰破坏 crocin 的结构,一般通过控制摩尔比和反应时间,使每个 crocin 分子上仅修饰 1–2 个 CY3 单元,从而兼顾荧光信号与产物活性。
在纯化方面,CY3-saffron 的反应产物常呈现混合物形式,需要经过 反相高效液相色谱(RP-HPLC) 分离。利用梯度洗脱(如水–乙腈体系,含 0.1% TFA)可以区分未修饰的 crocin、游离的 CY3 以及偶联产物。通常 CY3 标记后的产物因分子量增加、疏水性增强,在 HPLC 色谱图中表现出延迟的保留时间。通过收集目标峰并冷冻干燥,即可获得高纯度 CY3-saffron。
在表征方面,UV-Vis 光谱 和 荧光光谱 是直接的检测手段。产物通常在 440 nm(crocin 吸收峰)和 550 nm(CY3 吸收峰)同时表现吸收,发射光谱则在 570 nm 附近出现强烈荧光。质谱(MALDI-TOF 或 ESI-MS) 可确认分子量变化,从而验证 CY3 修饰的程度。核磁共振(NMR) 尤其是 1H NMR 可辅助判断修饰位点是否位于糖苷部分或羧基部分。为了进一步确认结构,常结合 红外光谱(FTIR) 检测酯键或酰胺键的特征峰。
在实验应用中,CY3-saffron 的纯度与表征尤为关键,因为未修饰的藏红花分子和游离的 CY3 可能影响后续实验的信号准确性。高纯度的 CY3-saffron 可实现产物的可视化追踪,用于研究其在细胞摄取、代谢及分布过程中的动态行为。
综上,CY3-saffron 的制备与表征依赖于的偶联化学、严格的色谱纯化及多手段的光谱表征。通过 HPLC、质谱和荧光光谱等技术,能够确保所得复合物的结构与纯度,从而保证其在化学与生物学研究中的可靠性和实用价值。
产品名称:CY3-saffron,花菁染料CY3标记藏红花
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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