Cy3-Inulin，花菁染料CY3标记菊粉的反应条件

Cy3-Inulin是一种将花菁染料Cy3与菊粉（Inulin）通过共价偶联形成的荧光标记多糖，用于生物示踪、药物递送研究、细胞成像及多糖代谢研究。菊粉是一类由果糖（Fructose）单元通过β-2,1糖苷键连接而成的多糖，分子量可变，通常含有一个末端葡萄糖残基。其水溶性好、生物相容性高，是理想的生物材料和药物载体。Cy3是花菁类染料，具有强可见光吸收（λmax约550 nm）、红橙色荧光发射（λem约570 nm）、高量子产率和良好光稳定性，通过共价偶联可赋予菊粉荧光示踪能力。

合成步骤

材料准备

制备Cy3-Inulin所需原料包括高纯度菊粉、多糖羟基活化试剂（如碳酸氢盐缓冲液）、Cy3活性衍生物（如Cy3-NHS酯、Cy3-ITC或Cy3-hydrazide）、有机溶剂（如DMSO或DMF，用于溶解染料）、去离子水及适当的pH调节剂。为保证偶联效率和多糖结构完整性，整个反应通常在低温（0–4℃）下进行。

多糖活化

菊粉分子上主要含有多羟基，直接与Cy3-NHS酯反应效率低，因此需要将多糖活化为可反应的官能团。常用方法包括：

将多糖末端醛基化，通过温和氧化（如NaIO₄）将末端葡萄糖或果糖的醛化位点生成活性醛基；

或者通过碳酸酯活化法，使多糖羟基转化为对羟基苯磺酰酯（p-Nitrophenyl carbonate）或其他活性酯，以增强与氨基偶联效率。

Cy3偶联反应

将Cy3-NH₂或Cy3-hydrazide溶解于少量DMSO中形成高浓度储备液，然后缓慢加入活化后的菊粉溶液中。在温和的缓冲体系（pH 7.0–8.5）下反应数小时，使Cy3通过形成稳定的酰胺键或肼键共价连接至菊粉末端活性位点。为保证标记均一，可调节Cy3与菊粉的摩尔比，避免过度标记导致荧光自淬灭或多糖聚集。

反应条件控制

反应过程中需保持低温和适宜pH，以保护多糖链结构和Cy3荧光性能。缓慢搅拌可确保反应均匀，同时防止多糖分子间交联或凝胶化。反应时间通常为2–12小时，可根据标记效率适当延长。

纯化与去除游离染料

反应完成后，通过透析（分子量截断约3–10 kDa）、凝胶过滤或超滤柱去除未结合的Cy3和小分子副产物。透析或过滤缓冲液一般为PBS或去离子水，温度保持在4℃，直至外部溶液颜色基本清澈。

产物干燥与储存

纯化后的Cy3-Inulin可冻干得到稳定粉末，便于长期储存。若为液体储存，可加入少量防腐剂或剂（如少量甘油或抗坏血酸）稳定荧光性能，并在4℃或-20℃避光保存。

表征

产物可通过UV-Vis吸收光谱和荧光光谱确认标记成功。UV-Vis显示Cy3的特征吸收峰（λmax约550 nm），荧光光谱显示发射峰（λem约570 nm）。高效液相色谱（HPLC）或凝胶渗透色谱（GPC）可用于测定标记效率和分子量分布。

总结

Cy3-Inulin的合成通过菊粉活化、Cy3偶联、纯化及表征等步骤完成。关键在于多糖活化策略、Cy3与活性位点的选择性反应以及反应条件的控制。终产物兼具菊粉的水溶性和生物相容性，以及Cy3的高强度荧光，可用于生物成像、药物递送示踪及多糖动力学研究，为多糖类生物材料的功能化和可视化提供了有效手段。

产品名称：Cy3-Inulin，花菁染料CY3标记菊粉

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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