Cy5.5-OVA，花菁染料CY5.5标记卵清蛋白的反应步骤概述

CY5.5-OVA 是将近红外荧光染料 CY5.5 与卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）共价偶联形成的功能性蛋白分子。OVA 作为常用模型抗原，用于免疫学实验、疫苗研究和药物载体研究。通过 CY5.5 偶联，可实现 OVA 的荧光标记和体内外可视化追踪，同时保持蛋白的抗原性。

反应步骤概述

准备工作

将 OVA 溶解于缓冲液（如 PBS，pH 7.4–8.0）中，确保蛋白质稳定且易于溶解。

CY5.5 以 NHS 酯形式准备，溶于 DMSO 或 DMF 中，用于与 OVA 伯胺偶联。

控制 CY5.5 与 OVA 摩尔比，通常为 5–10:1，以获得适度标记而避免荧光淬灭或抗原性损失。

偶联反应

在室温或 4°C 条件下，将 CY5.5-NHS 酯缓慢加入 OVA 溶液中。

通过伯胺对活性酯的亲核攻击，形成稳定的 酰胺键，实现染料与蛋白质共价结合。

反应时间通常为 1–4 小时，期间避免光照和高温，以防 CY5.5 荧光衰减和蛋白降解。

反应终止与缓冲调整

反应结束后，可加入甘氨酸或 Tris 缓冲液终止未反应的活性酯。

调整 pH 至中性，确保蛋白质结构稳定。

纯化与表征

通过透析、凝胶过滤或超滤除去未反应的 CY5.5 和小分子杂质。

荧光光谱和 UV-Vis 吸收谱可用于确认偶联效率。

SDS-PAGE 可检测蛋白分子量变化及标记均一性，保证 OVA 的完整性和可用性。

实验应用优势

CY5.5-OVA 可用于免疫学实验中模型抗原的体内追踪和抗原呈递研究。

结合纳米载体或疫苗体系，可同时实现靶向递送和荧光成像。

偶联后的蛋白质保留荧光和抗原活性，实现功能与可视化的整合。

综上，CY5.5-OVA 的制备通过 NHS 酯-伯胺偶联反应 完成，步骤温和、可控，偶联产物兼具 蛋白抗原性与近红外荧光特性，应用于免疫学研究、药物递送及体内外成像实验。

产品名称：Cy5.5-OVA，花菁染料CY5.5标记卵清蛋白

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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