Cy5-trichosanthin,花菁染料Cy5标记天花粉蛋白的物理性质
Cy5-trichosanthin(Cy5 标记天花粉蛋白)是一种由蛋白质天花粉蛋白(Trichosanthin, TCS)与近红外花菁染料 Cy5 通过共价偶联构建的荧光标记蛋白复合物。该偶联物兼具 TCS 蛋白的分子特性与 Cy5 的光学特性,在结构、理化性质以及功能表现上均具有优势。其设计核心是利用 Cy5 的光学可追踪性与 TCS 的特定蛋白性质相结合,使分子能够同时具备荧光信号与蛋白质的生物分子特征。
从化学与分子构造角度看,Trichosanthin 是一种分子量约 27–30 kDa 的单链糖蛋白,属于核糖体失活蛋白(RIP)家族,分子内部含有丰富的二硫键和折叠稳定的 α-螺旋与 β-折叠结构。TCS 分子表面存在多种可修饰的氨基酸残基,如赖氨酸上的 ε-氨基、半胱氨酸上的巯基等,这些反应位点通常被用来与带有活性基团(如 NHS 酯或马来酰亚胺)的 Cy5 偶联。通过这种方式,Cy5 可以与 TCS 共价结合,形成稳定的荧光蛋白偶联物。
Cy5 部分属于典型的花菁染料,核心结构为两端氮杂芳环通过多甲烯链连接而成的高度共轭体系。Cy5 的吸收波长位于 640 nm 左右,发射波长在 660–670 nm,属于红光至近红外区域。该光谱特性具有背景干扰低、穿透能力强的优势,适合对生物样品进行检测与成像。Cy5 分子通常在其芳香基团上带有磺酸基团,提高水溶性并减少自聚集,从而保证在水相环境下的荧光强度。
Cy5-trichosanthin 的物理性质主要体现在以下几个方面:
1. 分子大小与形态特征
Cy5 标记后的 TCS 分子量比未标记的蛋白增加约 0.5–1 kDa(取决于标记数量)。由于 Cy5 分子体积较小(相对于蛋白骨架而言),其引入不会改变蛋白整体的空间折叠。通过动态光散射(DLS)分析,Cy5-TCS 的水合直径通常维持在 4–6 nm 范围,表现为单分散球形颗粒状态。
2. 溶解性
Trichosanthin 本身为水溶性蛋白,Cy5 具有磺酸基团修饰,增强水溶性,因此偶联产物在水缓冲体系(PBS、Tris 缓冲液等)中具有良好的溶解性。Cy5-TCS 在中性条件下表现为透明溶液,不易形成沉淀或聚集。
3. 稳定性
蛋白部分的二硫键与氢键网络赋予分子良好的结构稳定性。Cy5 标记通常不会破坏 TCS 的二级与三级结构,因此蛋白的整体折叠保持稳定。Cy5 荧光团具有较好的光稳定性,但在长时间强光照射下仍会发生光漂白。此外,蛋白部分在高温或极端 pH 下易发生变性,因此 Cy5-TCS 佳储存条件为 4 °C 避光保存,避免反复冻融。
4. 光学性质
Cy5-TCS 在 640 nm 处显示特征性吸收峰,荧光发射峰位于 660–670 nm,发射光强与 Cy5 的取代率(标记度)成正比。通常在标记度为 2–4 mol Cy5/mol 蛋白时,可获得较高信噪比且避免因过度标记导致荧光淬灭。其荧光寿命保持在 1–1.5 ns 范围内,适用于常规荧光显微成像与流式检测。
5. 电荷与表面特性
Cy5 分子上的磺酸基赋予偶联物一定负电荷,使 Cy5-TCS 分子整体表面电荷分布较未标记蛋白更偏负性。电泳迁移实验(SDS-PAGE 与荧光扫描)表明 Cy5-TCS 在蛋白条带处可见红色荧光信号,与考马斯亮蓝染色条带重合,证明了标记的均一性与完整性。
6. 储存与稳定性条件
Cy5-trichosanthin 应储存在避光、低温环境中,常用缓冲体系为含 10–20% 甘油的 PBS 溶液以防止蛋白变性。冻干粉末状态下的 Cy5-TCS 稳定性更佳,可在 −20 °C 长期保存,重新溶解后仍保持光学与结构特性。
产品名称:Cy5-trichosanthin,花菁染料Cy5标记天花粉蛋白
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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