CY5-Agmatine，花菁染料CY5标记亚精胺的纯化步骤

亚精胺（Agmatine, 4-胍基丁胺）是一种存在的小分子多胺，含有一个末端胍基和一个伯胺，分子量约为 130 Da。它在细胞内具有调节信号转导和神经递质作用的功能。将亚精胺与花菁染料 Cy5 偶联，能够形成荧光探针（Cy5-Agmatine），用于分子追踪和活体成像研究。其合成步骤如下：

原料准备

选用高纯度亚精胺盐酸盐，先将其中和生成游离胺形式。通常使用碳酸氢钠或三乙胺（TEA）调节 pH，使伯胺能够参与亲核反应。Cy5-NHS ester 或 Cy5-活性酯则溶解于干燥的二甲基亚砜（DMSO）或二甲基甲酰胺（DMF），以避免水解失活。

偶联反应

将游离亚精胺溶液缓慢加入 Cy5-NHS ester 溶液中。反应通过伯胺对 NHS 酯的亲核攻击，生成稳定的酰胺键。该过程通常在室温条件下进行，搅拌 6–12 小时，pH 控制在 7.5–8.5，以保证亚精胺伯胺的活性，同时避免胍基的副反应。反应过程中需避光操作，以减少 Cy5 光漂白。

终止反应

反应结束后，可加入适量乙醇胺或 Tris 缓冲液封闭残余 NHS 酯，避免未反应的 Cy5 对后续应用造成干扰。

纯化步骤

由于反应混合物中可能含有未反应的 Cy5 和副产物，通常采用以下方法纯化：

透析法（分子量截留膜 1–3 kDa）去除游离小分子；

高效液相色谱（HPLC）根据疏水性差异分离 Cy5-Agmatine；

冻干处理获得纯净粉末。

产物表征

UV-Vis 光谱显示 640–650 nm 的 Cy5 特征吸收峰；

荧光光谱激发波长约 649 nm，发射峰在 670 nm 附近；

质谱（ESI-MS 或 MALDI-TOF）显示分子量较未修饰亚精胺增加约 700–800 Da；

NMR 可验证伯胺转化为酰胺的化学位移变化。

储存条件

Cy5-Agmatine 应避光、低温（−20 ℃）冻干保存。溶液状态可短期储存在 4 ℃，避免反复冻融以维持荧光活性。

产品名称：CY5-Agmatine，花菁染料CY5标记亚精胺

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

Sulfo-CY3.5-NYZL1

磺酸基CY3.5标记R8

Sulfo-Cy3.5-R8

磺酸基CY3.5标记SA

Sulfo-Cy3.5-SA

磺酸基CY3.5标记TAT

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09