CY5-TF，花菁染料CY5标记转铁蛋白的化学反应

转铁蛋白（Transferrin, TF, CAS 15206-37-2）是一种血浆蛋白，分子量约 76 kDa，具有高亲和力结合铁离子的能力。TF 在体内负责铁的运输和细胞摄取，通过受体介导的内吞途径进入细胞。将其与花菁染料 Cy5 偶联（Cy5-TF）可获得荧光标记转铁蛋白，用于受体追踪、药物递送研究及细胞摄取实验，其化学反应原理主要基于蛋白质氨基的酰胺偶联机制。

在化学反应中，Cy5-TF 的核心是 羧基活化与胺基亲核偶联。Cy5-NHS 酯或 Cy5-活性酯首先通过与 TF 表面赖氨酸残基的 ε-氨基反应形成稳定酰胺键，将荧光染料共价固定于蛋白质表面。该反应在缓冲体系中进行，pH 通常维持在 7.5–8.5，以确保胺基处于去质子化状态，增强亲核性，同时避免蛋白质构象改变或聚集。

具体反应原理可分为三个阶段：，Cy5 的羧基通过 NHS 酯或活性碳二亚胺活化形成高反应性中间体；第二，TF 表面赖氨酸氨基对该中间体进行亲核攻击，生成稳定的酰胺键，同时释放 N-羟基琥珀酰亚胺或中间体副产物；第三，通过适当封闭未反应的活性位点（如乙醇胺处理），保证产物稳定性并减少非特异性反应。

该反应的特点包括：一是 化学选择性高，优先标记蛋白表面自由氨基，不破坏铁结合位点或构象；二是 条件温和，反应温度通常在室温或轻微低温，避免蛋白质变性；三是 可调控标记密度，通过 Cy5 与 TF 摩尔比调节，可在保持生物活性的前提下获得足够荧光信号。

反应完成后，Cy5-TF 可通过透析、凝胶过滤或层析去除未反应的 Cy5，保证荧光纯度。通过 UV-Vis 光谱和荧光光谱可确认标记效率，同时可利用 SDS-PAGE 和质谱检测分子量变化，验证共价结合。

综上，Cy5-TF 的化学反应原理核心是 NHS 酯活化羧基与蛋白赖氨酸氨基的酰胺偶联，通过温和、选择性高的化学策略，实现 Cy5 与 TF 的稳定共价结合，同时保持蛋白质功能和生物活性。该反应原理为荧光蛋白标记、细胞受体追踪及药物递送机制研究提供了基础。

产品名称：CY5-TF，花菁染料CY5标记转铁蛋白

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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