CY7-ConA,花菁染料CY7标记刀豆蛋白A的反应机理
花菁染料CY7标记刀豆蛋白A(CY7-ConA)是一种由近红外荧光染料与植物来源凝集素共价结合的荧光探针。刀豆蛋白A(Concanavalin A, ConA)是一种四聚体结构的糖结合蛋白,分子量约104 kDa,能特异性识别并结合α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基,因而常被用于研究糖蛋白、糖脂及多糖结构。CY7染料因其近红外发射特性,常用于体内和深层组织成像。将ConA与CY7结合,可获得一种高灵敏度的荧光凝集素探针,适用于糖类识别与细胞表面糖链示踪。
其反应机理主要基于ConA表面赖氨酸残基的ε-氨基与CY7活性酯(如CY7-NHS ester)的酰胺键偶联。具体机理为:(1)在弱碱性缓冲液(pH 8.0–8.5,如碳酸氢盐缓冲液)条件下,ConA表面的赖氨基去质子化,成为更强的亲核试剂。(2)CY7-NHS酯结构中的N-羟基琥珀酰亚胺是良好的离去基,当赖氨基对其羰基碳发起亲核攻击时,发生酰胺键形成反应。(3)NHS基团离去,生成稳定的酰胺键,将CY7共价固定在ConA分子上。(4)由于ConA含有多个赖氨酸残基,通常在优化条件下可以实现多点标记,但为保持其糖结合活性,需严格控制染料与蛋白摩尔比(一般为1:2到1:5之间),避免过度修饰导致构象改变。(5)标记后的CY7-ConA分子保留了ConA对甘露糖和葡萄糖的识别能力,同时获得近红外荧光信号,从而能在复杂体系中进行高信噪比的糖类检测。
该机理本质上是典型的NHS酯-氨基反应,即亲核酰胺化过程,反应动力学快速且高效,副产物为NHS,易于分离。产物CY7-ConA常通过透析或凝胶过滤去除游离染料,并用紫外-可见光光谱及SDS-PAGE分析确认结合程度。该标记探针在实验应用上用于糖链分布研究、细胞表面糖蛋白成像以及糖相关信号通路分析,尤其适合深层组织近红外荧光成像。
产品名称:CY7-ConA,花菁染料CY7标记刀豆蛋白A
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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