CY7-Streptavidin,花菁染料CY7标记链霉亲和素的合成步骤
花菁染料CY7标记链霉亲和素(CY7-Streptavidin)是一种将近红外荧光染料CY7通过共价偶联与蛋白质链霉亲和素(Streptavidin)结合的功能化分子。链霉亲和素是一种四聚体蛋白质,每个亚基可特异性结合生物素,用于生物标记、免疫检测及分子捕获系统。CY7-Streptavidin整合了链霉亲和素的生物特异性结合能力与CY7的近红外荧光特性,可用于体内外可视化追踪和定量分析。
合成步骤主要包括以下环节:
蛋白质准备:将高纯度链霉亲和素溶解于适宜缓冲液中(如磷酸盐缓冲液,pH 7.4–8.0),确保蛋白质溶液无热降解,浓度一般控制在1–5 mg/mL。可使用透析或超滤去除低分子杂质和盐类。
CY7染料活化:选择CY7-NHS或CY7-COOH为活性染料。如果使用CY7-COOH,通过EDC/NHS体系生成活性NHS酯,提高与蛋白质氨基的偶联效率。活化过程通常在干燥、有机溶剂或水相缓冲中进行,避免高温和强光以保持染料稳定。
偶联反应:将活化的CY7-NHS缓慢加入链霉亲和素溶液中,反应在室温下进行2–4小时或4℃下过夜,pH保持在7.0–8.0,以保证赖氨酸氨基与CY7-NHS高效反应形成酰胺键。偶联摩尔比可调控荧光标记密度,避免过度标记引起蛋白质构象破坏或结合活性降低。
纯化与分离:反应完成后,通过透析、凝胶过滤(如Sephadex G-25)或超滤去除未反应的自由CY7染料及副产物。纯化过程中监控近红外吸收或荧光信号,保证CY7-Streptavidin的纯度和功能完整性。
功能验证:偶联后的CY7-Streptavidin需验证生物活性,包括与生物素的结合能力和荧光性能。可通过荧光光谱、ELISA或亲和层析评估蛋白质活性及标记效率。
产品名称:CY7-Streptavidin,花菁染料CY7标记链霉亲和素
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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