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CY3-GRGDS,花菁染料标记抗粘附多肽GRGDS的物理化学性质
发布时间:2025-09-25     作者:axc   分享到:

CY3-GRGDS,花菁染料标记抗粘附多肽GRGDS的物理化学性质

CY3-GRGDS是一种将经典的五肽序列GRGDS(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser)与花菁类荧光染料Cy3偶联而成的荧光标记多肽探针。GRGDS作为整合素识别的典型抗粘附序列,能够与多种细胞表面整合素(如αvβ3、α5β1)结合,从而干扰或调节细胞与基质蛋白(如纤连蛋白、胶原、层粘连蛋白)的粘附作用。通过在GRGDS分子上引入Cy3荧光团,不仅保留了其特异性的抗粘附与竞争结合能力,还赋予了其可见光区的强荧光信号,使其可在细胞生物学与生物材料研究中实现实时成像和定量分析。

Cy3属于花菁类染料,分子结构中含有两个芳环及共轭多烯链,吸收峰约在550 nm,发射峰在565–570 nm之间,具有高摩尔消光系数和良好的量子产率。其亲水性可通过磺酸化或引入PEG链改善,从而在水溶液和生物缓冲液中保持较好稳定性。将Cy3与GRGDS结合后,所得CY3-GRGDS兼具高光稳定性和生物活性,常用于细胞铺展实验、细胞-基质相互作用研究、整合素阻断实验以及荧光显微成像。

在物理化学性质上,CY3-GRGDS为中等分子量的多肽-染料偶联物,通常表现为红橙色粉末,易溶于水、PBS和DMSO,溶液中带有强烈橙红色荧光。由于R-G-D序列的生物活性,其在表面功能化研究、抗粘附涂层制备和微阵列芯片中也常用作对照探针。其偶联位点通常位于多肽N端的游离氨基,借助Cy3-NHS酯或Cy3-maleimide等活性衍生物与多肽进行定向结合。

制备方法

CY3-GRGDS的制备一般分为两步:多肽合成与染料标记。

多肽合成

GRGDS通常通过固相肽合成(SPPS)获得。常用Fmoc策略,在Rink amide树脂或Wang树脂上逐步偶联氨基酸。合成顺序为:在树脂上依次偶联Fmoc-Ser(tBu)-OH → Fmoc-Asp(OtBu)-OH → Fmoc-Gly-OH → Fmoc-Arg(Pbf)-OH → Fmoc-Gly-OH。每一步经DIC/HOBt或HBTU/DIPEA活化,偶联后进行去Fmoc处理(20%哌啶/DMF),直至序列完整。合成完毕后,用TFA/水/三异丙基硅烷(TIS)裂解体系切下多肽并去除侧链保护基团,经乙醚沉淀和冻干得到粗品。粗肽经HPLC纯化,得到高纯度GRGDS。

染料活化与偶联

荧光染料常采用活性酯形式,如Cy3-NHS ester。其反应基团能够与多肽N端或赖氨酸残基上的伯胺发生酰胺化反应。在缓冲液(常用碳酸盐缓冲液或PBS,pH 8.0–8.5)中溶解GRGDS,并将Cy3-NHS酯溶于少量DMSO后缓慢加入反应体系,保持摩尔比1:1.2–1.5。室温下避光搅拌反应1–3小时。完成后可直接用反相HPLC分离纯化,收集主要荧光峰,并经冻干得到红橙色CY3-GRGDS粉末。

表征与确认

所得CY3-GRGDS通常通过LC-MS确认分子量,HPLC检测纯度,紫外-可见光谱和荧光光谱验证其吸收与发射波长。高纯度的CY3-GRGDS在550 nm激发下具有强烈橙红色发光,可稳定用于细胞实验。

存储条件

CY3-GRGDS应避光、干燥保存,常规温度下短期稳定,长期建议-20 °C冷冻保存,使用时溶于水或PBS,避免反复冻融。

产品名称:CY3-GRGDS,花菁染料标记抗粘附多肽GRGDS

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

CY3-GRGDS

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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