Sulfo-Cy3-ethanediamine，水溶性花菁染料CY3标记乙二胺的制备方法

Sulfo-Cy3-ethanediamine为一类水溶性花菁（Cyanine-3）荧光探针，其花菁骨架上含有磺酸基（sulfo）以提高水相溶解性，且通过酰胺键连接一分子乙二胺（ethanediamine），保留一个游离伯胺供进一步官能化或直接用于偶联。此类探针在可见光区有强吸光与高荧光量子产率，典型吸收峰约在550±10 nm，发射峰约在560–570 nm，摩尔消光系数大（约10^5量级），适用于荧光显微、流式细胞及原位标记等生物影像与分析应用。由于磺酸基的存在，水溶性好、在生物缓冲液中分散性佳，且相对减少非特异性疏水吸附。

制备（概述）：常用方法为以Sulfo-Cy3-NHS（活化的N-羟基琥珀酰亚胺酯酯）与乙二胺进行亲核取代反应，生成目标酰胺产物。典型操作流程如下：

溶剂与试剂准备：称取适量Sulfo-Cy3-NHS，置于干燥无水DMF或DMSO中溶解（浓度视规模而定，常为1–10 mM）。另备无水或干燥的乙二胺作过量的亲核试剂（常用10–50倍当量）或以乙二胺水溶液并辅以有机碱（如DIPEA或三乙胺，0.5–2当量）以促进反应并捕获产生的酸。

加料与反应条件：在惰性气氛下（氮气或氩气），低温（0–5 ℃）下将乙二胺缓慢加入Sulfo-Cy3-NHS溶液，随后回温至室温并搅拌反应1–4小时。NHS酯对水敏感，若在水相反应，可采用缓冲体系（pH 8.0–8.5的碳酸盐缓冲或磷酸盐缓冲）并快速完成以减少水解。

反应监控：采用薄层色谱（TLC，不总是适用水溶性染料）、反相HPLC或LC-MS监控反应进程：观察NHS前体峰减小与目标产物峰生成。

停止反应与粗处理：反应完成后加入适量水稀释并用乙酸或稀酸调至中性以终止反应，若有未反应的过量乙二胺，可用拨干或透析初步处理（但分子量差异小，通常不够分离）。

纯化：推荐采用反相C18柱的半制备或制备HPLC进行纯化，流动相常用水（含0.1%三氟乙酸或甲酸）与乙腈或甲醇的梯度洗脱。收集目标峰并冻干得白色至橙红色固体。

表征：用高分辨质谱（HR-MS）确认分子量，用1H NMR（若溶剂与信号允许）、UV-Vis（测吸收谱并确定λmax）、荧光光谱（测发射峰、量子产率）以及反相HPLC（评估纯度）表征产物。

纯化与储存：纯品一般冻干后在-20 ℃避光保存，溶液使用生理缓冲时避免反复冻融并用避光、低温短期保存。建议以暗瓶或铝箔包裹保存，长期以干燥冷藏为宜。

注意事项：操作时注意NHS酯与胺反应放热与溶剂相容性；乙二胺挥发与刺激性较强，操作需在通风橱中并佩戴防护装备。避免强光照射与强氧化性环境以防染料降解。用于生物偶联前应彻底除去游离胺和小分子杂质，确保后续偶联选择性与生物相容性。

产品名称：Sulfo-Cy3-ethanediamine

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

ICG-Chitosan

吲哚菁绿标记壳聚糖

ICG标记壳聚糖Chitosan与RB罗丹明B标记壳聚糖Chitosan

RB-壳聚糖

RB-Chitosan

RB标记壳聚糖

罗丹明B标记壳聚糖

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09