Sulfo-CY7.5-NHS,水溶性花菁染料CY7.5标记N-羟基琥珀酰亚胺酯的反应机制
Sulfo-Cy7.5-NHS 是一种水溶性近红外花菁染料衍生物,由 Cy7.5 荧光核心与 N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)官能团共价连接形成。Cy7.5 是 Cy7 的延伸型染料,吸收波长约 780 nm,发射波长约 800–810 nm,具有优异的光稳定性、高量子产率和低自发荧光背景,适合深组织成像。磺酸基(–SO₃⁻)修饰提高分子水溶性,使其在 PBS、HEPES、Tris 等缓冲体系中稳定溶解,同时减少非特异性吸附,提高生物相容性。NHS 官能团提供高反应活性,可与氨基化分子(蛋白质、多肽、小分子药物或纳米载体)高效偶联,形成稳定的酰胺键,是生物标记和荧光探针构建的重要工具。
反应机制
羧酸活化
Cy7.5 染料在羧基位置通过化学修饰转化为 NHS 酯。
N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)与羧酸在碳二亚胺(EDC)或 DCC 作用下形成活化中间体,产生 Cy7.5-NHS 酯,具备良好的亲核反应性。
酰胺键形成
NHS 酯与含游离氨基的分子(如蛋白质的赖氨酸侧链、氨基化多肽或氨基修饰药物)发生亲核加成反应。
氨基攻击羧酸羧碳,形成过渡态,并释放 NHS,终生成稳定的酰胺键连接 Sulfo-Cy7.5 与靶分子。
反应条件与特点
反应在 pH 7–8 的缓冲体系中进行,以维持氨基的活性,同时保护 Cy7.5 荧光核心不被破坏。
温和的室温条件即可完成反应,无需金属催化剂。
NHS 酯具有选择性高、反应速度快的优势,可实现短时间内高效偶联,同时减少非特异性副反应。
应用价值
可用于蛋白质标记、偶联、药物分子修饰及纳米载体功能化。
通过控制染料与氨基分子的摩尔比,可精确调节标记密度,保证荧光强度与生物活性兼顾。
偶联产物稳定,可在体内外长期监测和成像。
表征方法
UV-Vis 光谱:确认吸收波长 780 nm。
荧光光谱:发射峰约 800–810 nm,验证荧光性能。
质谱(ESI-MS):确认偶联分子量。
HPLC:分离纯化反应产物,确保高纯度。
Sulfo-Cy7.5-NHS 的反应机制充分体现了 NHS 酯的高活性和选择性,结合水溶性 Cy7.5 核心,使其成为构建高效、生物正交荧光标记系统的理想工具。
产品名称:Sulfo-CY7.5-NHS,水溶性花菁染料CY7.5标记N-羟基琥珀酰亚胺酯
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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