FITC-D-，+，-Trehalose Dihydrate，异硫氰酸荧光素标记D-，+，-海藻糖二水合物的合成步骤

异硫氰酸荧光素（FITC）标记的D-、+-、-海藻糖二水合物是一类将荧光探针共价连接到海藻糖分子上的衍生物，保留海藻糖的二糖骨架与亲水二水合物结构，同时引入荧光团以便于光学检测与定量分析。三种立体异构体（D-、+、-）在外消旋性或手性中心上有所差异，影响与生物大分子或受体相互作用的立体选择性。FITC的异硫氰酸基可与含胺基的衍生海藻糖通过加成反应形成稳定的硫脲键，产物具备良好的光学性质（强吸收与高荧光量子产率）、水溶性与实验可操作性。

合成步骤概述：1）前体制备：以海藻糖二水合物为起始物，必要时通过保护/去保护策略保护还原端或特定位点。若起始糖无游离胺，先将还原端转化为含胺的衍生物（如通过氨化或糖胺化方法引入-CH2-NH2侧链），并用适当保护基（Boc等）暂时保护胺基防止副反应。2）FITC活化与偶联：称取适量FITC（异硫氰酸荧光素），在干燥的有机溶剂或混合溶剂（如DMSO：pH缓冲水相）中溶解，调节体系为弱碱性（pH约8.0-9.0，常用碳酸氢盐缓冲或三乙胺作为碱）。将含胺的海藻糖衍生物缓慢加入FITC溶液，室温下避光搅拌反应数小时至过夜，促进异硫氰酸基与胺基生成硫脲键。3）保护基去除与纯化：若使用了保护基，采用酸性或碱性条件去保护（如TFA去Boc），随后通过透析、凝胶过滤柱（Sephadex G-25）或反相高效液相色谱（RP-HPLC）去除未反应FITC及小分子杂质。4）分离与表征：采用层析或HPLC分离得到纯品，使用质谱（ESI-MS或MALDI-TOF）、核磁（1H NMR若可溶性允许）、红外光谱与紫外-荧光光谱确认分子量、键合形式与光学特性，记录吸收峰与荧光发射峰。5）贮存与使用建议：将纯品在暗处低温（-20℃）以干燥状态保存，水溶液应避光、置于4℃短期保存并添加少量防腐剂。实验使用时注意避光操作并校准荧光强度以便定量分析。

产品名称：FITC-D-，+，-Trehalose Dihydrate

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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