FITC-L-Mannitol,异硫氰酸荧光素标记L-甘露糖醇的主要合成步骤与研究策略
FITC-L-Mannitol 是通过将绿色荧光团 FITC(Fluorescein isothiocyanate)与 L-甘露糖醇偶联而形成的荧光标记多羟基糖醇衍生物。L-甘露糖醇是一种多羟基醇,亲水性强。为了实现 FITC 偶联,需要先在甘露糖醇分子上引入氨基衍生物,通过氨基与 FITC 的异硫氰酸基形成稳定硫脲键。
1. 合成过程研究背景
L-甘露糖醇含有六个羟基,不含伯胺,直接与 FITC 偶联效率低。合成 FITC-L-Mannitol 的关键在于:
选择性氨基化甘露糖醇的特定位置(通常 C1 位或羟基保护后转化为氨基衍生物);
保证甘露糖醇环结构完整,不破坏其亲水性和分子识别特性;
避免多羟基干扰 FITC 的反应,提高偶联效率。
2. 主要合成步骤与研究策略
氨基化前处理:
对 L-甘露糖醇进行保护处理,如醚化或酯化部分羟基,暴露特定位点进行氨基化,生成可与 FITC 反应的伯胺。
FITC 偶联反应:
氨基化甘露糖醇溶解于弱碱性缓冲液(pH 8–9),FITC 溶解于 DMSO 中,缓慢加入反应体系,室温下搅拌 2–12 小时,避光进行。
反应机理研究:
氨基孤对电子进攻 FITC 异硫氰酸碳原子,形成硫脲中间体;
中间体质子转移后稳定生成硫脲键,完成荧光标记;
研究表明,摩尔比、pH、溶剂及反应时间均对产率和标记效率影响。
纯化与回收:
通过凝胶过滤或 HPLC 去除未反应 FITC 和副产物,得到高纯度 FITC-L-Mannitol。
3. 合成过程研究发现
保护基策略:部分羟基保护能够提高选择性,减少多点偶联;
缓冲体系优化:弱碱性缓冲液有利于氨基去质子化,提高亲核性,同时保持糖醇稳定;
温度与光照控制:FITC 易光漂白,高温可能导致糖醇环开环或分解,需严格控制;
标记效率评价:可通过荧光强度、HPLC 峰面积及质谱确认偶联成功率。
4. 应用与意义
FITC-L-Mannitol 保留糖醇的亲水性和生物相容性,可用于:
荧光追踪多羟基化物质在细胞或组织中的摄取;
药物载体表面功能化,提供荧光信号与化学活性位点;
糖识别研究及糖受体结合实验,帮助解析糖-蛋白相互作用机制。
产品名称:FITC-L-Mannitol,异硫氰酸荧光素标记L-甘露糖醇
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09