FITC-R5，异硫氰酸荧光素标记靶向肽R5的化学结构与性质

R5肽是一种阳离子富含精氨酸的靶向肽，其分子量一般在1–2 kDa之间，含有多个自由氨基（–NH₂）和羧基（–COOH）端点，这些官能团为化学修饰提供了便利位点。FITC（异硫氰酸荧光素）具有一个荧光核心结构和一个活性异硫氰酸基（–N=C=S），可与氨基发生共价反应形成稳定的硫代脲键（thiourea linkage），同时保留荧光性质。

反应原理

FITC-R5的制备基于异硫氰酸基与肽链中自由氨基的亲核加成反应。具体机理如下：

亲核攻击：肽链上赖氨酸或N-端氨基的自由氮原子对FITC的异硫氰酸碳原子发起亲核攻击。

中间体形成：形成一个短寿命的加成中间体，氮原子与碳原子形成共价键，同时硫原子保持单键状态。

硫代脲键稳定化：通过质子转移和重排，形成终稳定的硫代脲结构，将荧光素牢固连接到肽分子上。

反应条件：反应通常在弱碱性缓冲液中进行（pH 8.0–9.0），温度控制在室温或4℃，以保护肽的二级结构和功能。避光处理可防止FITC荧光团的光漂白。

制备与纯化

溶液配制：将R5肽溶解于碳酸盐缓冲液或PBS缓冲液中，FITC溶解于少量DMSO。

共价连接：按摩尔比1:1至1:2加入FITC至肽溶液，轻轻搅拌反应2–12小时。

纯化方法：可通过反相高效液相色谱（RP-HPLC）或凝胶过滤法去除未反应的FITC及副产物，确保产物的纯度和单分散性。

表征：利用质谱（MS）确认分子量变化，通过UV-Vis光谱（FITC λmax约495 nm）和荧光光谱（λem约520 nm）验证荧光标记效率。

特性与应用

稳定性：形成的硫代脲键在中性或弱碱条件下稳定，避免水解和荧光漂白。

生物相容性：R5肽为阳离子肽，其水溶性良好，标记后的FITC-R5仍保持较低的细胞毒性，适合体外细胞摄取和受体靶向实验。

实验用途：FITC-R5常用于细胞膜穿透研究、细胞摄取动力学及亚细胞分布分析，可结合共聚焦显微镜和流式细胞术实现高灵敏成像。

产品名称：FITC-R5，异硫氰酸荧光素标记靶向肽R5

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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