FITC-GCDCA,异硫氰酸荧光素标记甘氨鹅去氧胆酸的反应机制
异硫氰酸荧光素标记甘氨鹅去氧胆酸(FITC-GCDCA)是一种将甘氨鹅去氧胆酸(Glycochenodeoxycholic acid, GCDCA)与FITC通过共价方式连接的功能化分子。GCDCA分子具有甾体骨架和羧基末端,与甘氨酸形成酰胺键,使分子既保持胆汁酸的生物活性,又提供可标记的氨基位点。FITC的引入赋予分子绿色荧光,可用于胆汁酸运输、膜相互作用及药物递送体系的可视化研究。
FITC-GCDCA的反应机制主要基于异硫氰酸基团与GCDCA氨基的亲核加成反应,具体如下:
反应位点选择:GCDCA通过甘氨酸端引入的游离氨基为主要反应位点。氨基在弱碱性条件下去质子化,成为良好的亲核试剂,而甾体骨架及羟基保持不反应性,从而确保分子结构的完整性和生物活性。
亲核加成反应:FITC分子上的异硫氰酸基(–N=C=S)对亲核氨基具有高度选择性。在室温弱碱性缓冲液中,氨基的孤对电子攻击异硫氰酸碳原子,形成中间体硫脲,随后质子转移完成硫脲键的生成。反应方程式可简化为:
反应条件优化:反应通常在pH 8–9的缓冲液中进行,避免过酸或过碱环境对甾体骨架及FITC光化学性质造成损伤。温和搅拌可确保分子充分接触,反应时间一般数小时即可达到高转化率。
产物稳定性:生成的硫脲键具有良好的热力学和光化学稳定性,在水相和弱碱性环境下不易水解,保证FITC-GCDCA在储存和生物体系中的稳定性。
监控与表征:反应过程中可通过紫外-可见光谱监测FITC特征吸收峰(约495 nm)及荧光发射峰(约520 nm)确认标记进程。反应完成后,通过HPLC或透析去除未反应FITC,利用质谱和NMR验证分子结构及硫脲键形成情况。
应用前景:通过上述反应机制,FITC-GCDCA兼具胆汁酸的生物活性和荧光可视化功能,可用于胆汁酸摄取与转运实验、细胞膜相互作用分析以及胆汁酸介导的药物递送系统研究,为基础生物化学及药物研究提供可靠实验分子。
产品名称:FITC-GCDCA,异硫氰酸荧光素标记甘氨鹅去氧胆酸
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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