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(Transferrin)TF-PEG-DOPE,转铁蛋白-聚乙二醇-二油酰基磷脂酰乙醇胺的合成方法与纯化
发布时间:2025-09-30     作者:wyh   分享到:

产品名称:(Transferrin)TF-PEG-DOPE,转铁蛋白-聚乙二醇-二油酰基磷脂酰乙醇胺的合成方法与纯化

1. 结构组成与功能协同

核心组分:

转铁蛋白(Transferrin, TF):天然铁离子运输糖蛋白(分子量约80 kDa),通过特异性结合肿瘤细胞表面过表达的转铁蛋白受体(TfR),实现靶向递送;其铁结合能力可调控细胞内铁代谢,增强肿瘤细胞杀伤效果。

PEG链(分子量1k-20k Da):赋予亲水性、生物相容性及长循环特性,减少免疫原性,延长药物半衰期;通过空间位阻效应减少载体与血清蛋白的非特异性结合。

DOPE(二油酰磷脂酰乙醇胺):天然磷脂成分,形成六方相结构,在肿瘤酸性微环境(pH 5-6)或细胞内内涵体中触发膜融合,促进药物/核酸释放;增强脂质体或脂质纳米颗粒(LNP)的膜融合能力和细胞摄取效率。

2. 合成方法与纯化

合成策略:

模块化偶联:通过EDC/NHS或SMCC交联剂,将TF的氨基与PEG-DOPE的羧基偶联,形成稳定酰胺键;反应在无水无氧环境(如DMF/氯仿)中20-40℃进行,需控制pH 6.5-7.5以避免蛋白质变性。

点击化学优化:采用CuAAC或SPAAC反应,通过叠氮/炔基修饰实现高效、选择性偶联,减少副产物。

脂质体形成:将TF-PEG-DOPE与胆固醇、磷脂等混合,通过薄膜水合法或超声破碎法制备脂质体,粒径可控(50-200 nm)。

纯化技术:透析(截留分子量30 kDa)、柱层析(Sepharose CL-4B)或HPLC纯化,纯度≥95%。结构验证通过SDS-PAGE(确认TF条带)、质谱(MALDI-TOF)及红外光谱(FTIR,检测PEG亚甲基信号δ 3.5-3.8 ppm)。

3. 物理化学性质

溶解性与稳定性:溶于水及极性有机溶剂(如PBS、DMSO),PEG链增强亲水性;TF在生理pH(6-8)及低温(-20℃)下稳定,需避光保存以防止氧化变性;DOPE的六方相结构在酸性环境(如肿瘤微环境)中触发膜融合。

电荷与膜融合特性:弱负电荷减少非特异性吸附,DOPE的磷脂双层结构在肿瘤酸性微环境中促进内容物释放。

光谱特性:TF的紫外吸收峰(280 nm)可用于定量分析;偶联荧光探针(如Cy5)或放射性同位素(如⁶⁸Ga)后,可实现荧光/核素成像。

(Transferrin)TF-PEG-DOPE,转铁蛋白-聚乙二醇-二油酰基磷脂酰乙醇胺

关于我们:

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