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FITC-Rosmarinic Acid,异硫氰酸荧光素标记迷迭香酸的结构表征
发布时间:2025-10-09     作者:axc   分享到:

FITC-Rosmarinic Acid,异硫氰酸荧光素标记迷迭香酸的结构表征

FITC-Rosmarinic Acid 是通过异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate,FITC)与迷迭香酸(Rosmarinic Acid, RA)偶联形成的荧光标记化合物。RA分子中含有羧基和酚羟基,为荧光偶联提供可能的改性位点。由于FITC的异硫氰酸基(–N=C=S)主要与氨基发生亲核加成反应,而RA分子缺乏自由氨基,因此通常需先对RA进行氨基化衍生化处理,以获得可与FITC反应的底物。

具体步骤通常包括以下几个环节:首先,将RA的羧基活化,常用方法是通过EDC(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺)和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)形成NHS酯中间体。该中间体具有良好的亲核反应活性,可在温和条件下与含氨基的短链胺(如乙二胺)反应,生成RA-胺衍生物。这一步骤能够为后续的FITC偶联提供稳定的反应位点,同时保留RA的酚羟基结构。

随后,将RA-胺衍生物溶解于弱碱性缓冲液(pH 8.0–9.0)中,并加入FITC。在这一条件下,FITC的异硫氰酸基与RA-胺衍生物的伯胺或仲胺发生亲核加成反应,形成稳定的氨基异硫氰酸酯(thiourea)键。反应通常在室温避光环境下进行,以减少FITC光降解及副反应的发生。反应时间可根据转化效率进行调整,一般为数小时至过夜,以保证偶联产物的形成。

反应完成后,混合物中含有FITC-Rosmarinic Acid、未反应的FITC以及少量副产物。为获得高纯度产物,可采用高效液相色谱(HPLC)或凝胶过滤色谱进行纯化。HPLC通过分子极性或疏水性差异实现产物分离,并通过荧光检测确认目标物。纯化后,FITC-Rosmarinic Acid通常呈黄色至橙色固体,水溶性良好,适合于生物成像和分析实验使用。

结构表征包括^1H-NMR、^13C-NMR和质谱(MS),用于验证FITC与RA偶联位置及产物分子量。紫外-可见光谱显示FITC-Rosmarinic Acid在约495 nm有吸收峰,荧光光谱在约520 nm发射光,表明荧光性能保持良好。

整体流程包括RA羧基活化、胺衍生化、FITC偶联、反应条件控制以及纯化与结构表征,形成稳定的thiourea键连接。该标记分子可用于RA在细胞或组织中的分布研究、荧光追踪实验以及生物分析应用。通过控制反应条件和纯化手段,可确保产物结构完整、荧光活性稳定,为实验提供可靠的可视化工具。

产品名称:FITC-Rosmarinic Acid

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

FITC-Rosmarinic Acid

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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