FITC-Dextran,异硫氰酸荧光素标记葡聚糖/右旋糖酐的储存与使用条件
FITC-Dextran 是通过异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)与葡聚糖(Dextran, 右旋糖酐)偶联形成的荧光标记多糖。所用Dextran 分子量为40 kDa,属于中高分子量多糖,具良好的水溶性、化学稳定性和生物相容性。Dextran 由 α-D-葡萄糖残基通过α-(1→6)主链连接,并带有少量α-(1→3)支链,分子中含有大量羟基和还原性末端,为化学改性提供反应位点。FITC-Dextran 结合了葡聚糖的水溶性和FITC的荧光功能,可用于荧光标记、细胞追踪、分子扩散研究以及药物递送体系的示踪分析。
40 kDa 的Dextran具有适中的分子量,在保持溶液流动性和渗透性的同时提供足够的分子链长度,用于调控荧光标记分子的空间分布和多功能化性能。FITC-Dextran 的合成路线主要包括以下步骤:
Dextran 的氨基化衍生
原始Dextran 分子表面含有羟基,无法直接与FITC反应。首先通过氨基化方法将部分羟基转化为伯胺或仲胺功能团,为FITC偶联提供亲核位点。典型方法为利用氨水或乙二胺在温和条件下与Dextran 进行还原胺化反应,可选择性在还原末端或支链羟基上引入氨基。反应在中性至弱碱性条件下进行,温度通常控制在室温至轻微加热(25–50℃),避免多糖降解。氨基化程度可通过调节氨基试剂摩尔比和反应时间控制,以确保FITC偶联的均匀性和荧光信号稳定。FITC 偶联反应
将FITC 溶解于无水乙醇或DMSO 中,并缓慢加入到氨基化Dextran 溶液中,反应体系为弱碱性缓冲液(如碳酸氢钠缓冲液,pH 8.0–9.0)。FITC 的异硫氰酸基(–N=C=S)与Dextran 上的胺官能团发生亲核加成,形成稳定的氨基异硫氰酸酯(thiourea)键。反应通常在室温避光条件下进行数小时至一夜,以保证高偶联效率和荧光团稳定性。FITC与Dextran 的摩尔比可根据目标标记度进行调整,高比例FITC可增强荧光信号,而低比例可避免分子间猝灭和聚集。纯化与分离
偶联反应完成后,需要去除未反应的FITC及小分子副产物。纯化方法主要包括透析、凝胶过滤或超滤。透析一般采用适当分子量截断(MWCO ~10 kDa)膜,将FITC-Dextran 保留在膜内,同时将游离FITC排出。凝胶过滤(如Sephadex G-25 或 Sephadex G-50)可进一步分离标记产物,保证分子均一性和荧光性能。纯化后的FITC-Dextran 溶液通常呈均匀透明水溶液,便于储存和实验使用。标记度与浓度测定
FITC-Dextran 纯化后可通过紫外-可见光谱或荧光光谱测定荧光团浓度,同时测定Dextran浓度,计算标记度(Degree of Substitution, DS)。标记度调控对荧光强度、溶液黏度和分子稳定性有重要影响。通过合理控制标记度,可获得高信号且保持分子水溶性和化学稳定性的产物。储存与使用条件
FITC-Dextran 溶液一般储存于4℃避光环境中,以保持荧光强度和分子稳定性。冻干固态形式可长期保存,使用前溶解于缓冲液。分子量为40 kDa 的FITC-Dextran 具有适中扩散速度和溶液黏度,适用于细胞摄取实验、血管通透性研究及药物递送追踪实验。
产品名称:FITC-Dextran
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09