FITC-Artemisinin,异硫氰酸荧光素标记青蒿琥酯用于荧光示踪
FITC-Artemisinin 是通过异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)与青蒿琥酯(Artemisinin, ART)分子偶联形成的荧光标记化合物。青蒿琥酯是一种含有内酯环和过氧桥结构的天然小分子,其分子中含有羟基、醚键及环氧化结构,可通过化学修饰或间接偶联实现荧光标记。FITC 的异硫氰酸基可与衍生的氨基或胺化位点形成稳定的氨基异硫氰酸酯键,从而实现荧光标记,使分子既保持原有化学骨架特性,又获得荧光信号特性。FITC-Artemisinin 可用于分子示踪、细胞摄取研究及分子分布分析等实验。
反应机理与偶联策略
青蒿琥酯自身不含可直接与FITC反应的伯胺或仲胺基团,因此通常需通过化学改性引入活性氨基位点。常用策略包括:该反应为亲核加成反应,FITC 的碳原子对氮原子具有电子亲和性,而氨基作为亲核试剂攻击 FITC 的异硫氰酸碳,实现共价结合。反应温和,避免破坏青蒿琥酯的内酯环和过氧桥结构,以保持化学骨架稳定。
在青蒿琥酯分子上引入短链氨基衍生物(如通过醇羟基与胺化试剂形成酰胺键或醚键),形成带有自由氨基的衍生物。
FITC 的异硫氰酸基(–N=C=S)与衍生氨基在温和碱性条件下形成稳定的氨基异硫氰酸酯(thiourea)键,实现荧光标记。
溶剂与环境条件
FITC-Artemisinin 偶联反应通常在极性有机溶剂或水/有机混合体系中进行。常用溶剂包括:温度通常控制在室温至略高温(20–30℃)范围内,以保证反应效率并避免青蒿琥酯过氧桥开环。反应时间依具体条件而定,一般为数小时至一昼夜,可通过薄层色谱(TLC)或高效液相色谱(HPLC)监控反应进程。
有机溶剂:二甲基亚砜(DMSO)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)等,可溶解FITC和部分氨基衍生青蒿琥酯,提供均匀反应环境。
缓冲体系:轻度碱性缓冲液(pH 8.0–9.0,例如碳酸盐缓冲液)可促进氨基与异硫氰酸基的亲核加成反应,同时保护FITC的荧光特性。
摩尔比与反应浓度
为保证偶联效率且避免FITC过量造成的荧光淬灭,通常将FITC与氨基衍生青蒿琥酯按1:1至1.5:1摩尔比加入反应体系。反应体系中溶质浓度需适中,以保证溶解性和反应均匀性,典型浓度范围为0.1–5 mM。催化与辅助条件
该反应通常无需额外催化剂,但可加入微量碱(如三乙胺)调节体系pH,提高氨基亲核性和反应速率。反应过程中需避免强酸或高温,以免破坏青蒿琥酯结构或降低FITC荧光强度。后处理与纯化
偶联反应完成后,反应混合物通常通过透析、凝胶过滤或反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行纯化,以去除未反应FITC和未偶联青蒿琥酯衍生物。纯化后的FITC-Artemisinin 可溶于水或缓冲液中,形成均匀、稳定的荧光溶液,便于下游实验应用。应用相关条件
FITC-Artemisinin 可用于荧光示踪、细胞摄取分析及分布研究。反应条件设计需兼顾荧光稳定性和化学骨架完整性,因此温和、缓冲体系、适当溶剂及摩尔比控制是关键。适当使用Ahx或其他间隔链可减少荧光团与青蒿琥酯分子间的空间干扰,提高生物兼容性和实验信号可读性。
产品名称:FITC-Artemisinin
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09