iFluor 488 Tyramide的化学结构及反应活性

iFluor 488 Tyramide 是一种绿色荧光标记衍生物，激发峰约 495 nm，发射峰约 520 nm，基于 fluorescein 类荧光染料结构，具有高量子产率、光稳定性优良、低背景自发荧光的特点。Tyramide 是一种含苯乙酰胺结构的活性化基团，其反应活性主要依赖于过氧化物酶（HRP）催化生成的芳香自由基，可以迅速与邻近芳香族残基（如酪氨酸）共价偶联，从而实现靶分子高效标记与信号放大。

化学结构及反应活性

荧光核心（iFluor 488）

提供强烈绿色荧光信号，适用于多通道成像，可与红色或远红色荧光探针组合。

共轭芳香环体系确保量子产率高和光稳定性强，适合长时间成像实验。

Tyramide 官能团

含酚或苯乙酰胺结构（–C6H4–CH2–NH–CO–），可在 HRP 催化下生成芳香自由基。

自由基具有高反应性，可快速与邻近蛋白质的芳香族残基形成稳定共价键。

反应温和，避免破坏蛋白质或细胞结构。

反应机理

在 HRP 和 H2O2 存在下，Tyramide 的苯环氢被氧化生成自由基；

自由基攻击邻近酪氨酸残基，形成共价 C–C 或 C–O 键，实现荧光偶联；

由于反应发生在靶分子附近，可实现空间局部信号增强（tyramide signal amplification, TSA）。

反应活性特点

高选择性与局部化

HRP 催化反应局限于酶所在区域，可实现局部信号增强，避免非特异性标记。

对非芳香族残基或未被 HRP 激活的区域反应性低。

快速共价结合

反应速率高，通常在几分钟至几十分钟内完成。

生成的共价键在生理条件下稳定，不易解离，保证信号长期保持。

应用优势

适用于免疫组化、原位杂交、FISH 及活细胞或固定细胞标记。

多通道兼容，可与其他荧光染料组合进行多靶标检测。

可用于信号放大体系，提高低丰度靶分子检测灵敏度。

光稳定性好，可进行高分辨成像和长期实验追踪。

实验注意事项

需控制 H2O2 浓度和反应时间，避免过氧化物引起蛋白质损伤。

孵育缓冲液宜为 PBS 或 Tris 缓冲液，保持 pH 7–8。

标记后可通过洗脱或透析去除未反应的游离荧光染料。

产品名称：iFluor 488 Tyramide

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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