MPEG-Cyanine7，端可修饰的甲氧基聚乙二醇近红外荧光染料的反应步骤

MPEG-Cyanine7是一类由末端可修饰的甲氧基聚乙二醇（xMPEG，x通常代表功能化位点，如NH₂、COOH、N₃等）与近红外荧光染料Cyanine7（Cy7）通过共价键偶联形成的荧光标记高分子探针。xMPEG提供优异的水溶性与生物相容性，使探针在体内长循环并降低非特异性吸附；Cy7作为近红外二区荧光染料，具有穿透深、背景低、灵敏度高的优势，常用于活体成像、肿瘤靶向诊断、药物递送可视化等领域。因此，xMPEG-Cyanine7兼具“长循环 + 近红外成像”功能，是构建可视化纳米平台的重要核心模块。

在合成过程中，xMPEG与Cy7之间的连接通常依赖于活性酯化、酰胺键形成或Click化学反应，取决于xMPEG末端基团类型及Cy7衍生物结构。以下以常见的“MPEG-NH₂与Cy7-NHS酯”偶联为例，描述典型反应步骤：

步：原料活化与纯化

选用分子量合适的MPEG-NH₂（如2k、5k或10k），在真空或氮气保护下干燥以去除水分。Cyanine7通常使用具有NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）活性酯形式的Cy7-NHS，以保证高偶联效率。Cy7-NHS通常易受水解，应在低温、惰性气氛中保存。

第二步：溶剂选择与反应体系搭建

MPEG-NH₂溶于无水有机溶剂（如DMF、DMSO或无水CH₂Cl₂，DMF常用），浓度一般为10–50 mg/mL。Cy7-NHS溶于少量无水DMF，并等摩尔或略过量加入。为提高反应速率，可加入碱性催化剂（如DIPEA或TEA）调节pH至8.0–9.0，利于氨基攻击NHS酯。

第三步：酰胺键偶联反应

在氮气或氩气保护下搅拌反应，温度控制在室温至30 °C，时间2–24小时。反应过程中氨基攻击NHS酯生成稳定酰胺键，并释放NHS副产物。为避免自缩合或水解，需控制水含量并保持体系无杂离子。

第四步：初步纯化与溶剂置换

反应后，可通过减压蒸发或透析去除小分子溶剂。然后使用透析袋（Mw cutoff 2k或3.5k）对产物透析24–48小时，更换去离子水或PBS以去除未反应的Cy7、NHS和催化剂残留。

第五步：深度纯化与冻干

透析后溶液可进一步通过Sephadex凝胶层析或超滤浓缩，确保产物单峰分布。终将纯化溶液进行冷冻干燥，得到固体xMPEG-Cyanine7粉末，便于长期保存与后续修饰。

第六步：结构表征

UV-Vis吸收光谱：检测Cy7吸收峰（~750 nm），确认染料引入。

荧光光谱：发射峰约在780–810 nm，验证成像能力。

¹H NMR核磁共振：通过PEG特征峰与Cy7芳香区信号确认连接。

GPC或MALDI-TOF MS：确定分子量增加是否符合理论。

HPLC分析：检查纯度和游离Cy7残留。

第七步：可进一步功能化（x位点保留）

若xMPEG上另一端仍保留可修饰位点（如MPEG-NH₂-Cyanine7仍有羧基），可继续接入靶向分子、药物、肽或配体，构建多功能探针。例如：

PEG-Cy7-mannose（免疫细胞靶向）

PEG-Cy7-folate（肿瘤叶酸受体靶向）

PEG-Cy7-药物（可视化递送）

优点总结

PEG提高水溶性、稳定性、血液循环时间

Cy7实现深层近红外成像

共价键稳定，体内不易解离

可调接头结构控制间距与荧光效率

易扩展为多功能平台

产品名称：MPEG-Cyanine7

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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