AF488-Angiopep-2，AF488标记脑靶向肽的反应过程

AF488-Angiopep-2（AF488标记Angiopep-2） 是一种功能化荧光肽探针，由小分子荧光染料Alexa Fluor 488（AF488）与脑靶向肽Angiopep-2通过共价偶联形成。Angiopep-2是一种具有穿过血脑屏障能力的小肽，含多种赖氨酸残基和氨基末端，可作为药物递送和分子探针的载体。通过将AF488标记在Angiopep-2上，可同时实现肽链的靶向功能和可视化荧光信号，用于体外和体内的分子追踪、药物递送研究及成像分析。AF488具有优异的光学性能，其吸收峰约为495 nm、发射峰约为519 nm，荧光亮度高、光稳定性好，非常适合多通道荧光实验。

合成过程主要基于AF488的N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活性酯与Angiopep-2分子上的氨基（主要是赖氨酸侧链氨基或肽链N端氨基）发生共价偶联。具体步骤如下：首先，将AF488-NHS溶解于干燥的有机溶剂如DMSO或DMF中，制备成高浓度的活性溶液；随后将Angiopep-2溶解于适当缓冲体系（通常为pH 7.2~8.5的磷酸盐缓冲或碳酸盐缓冲）中，确保氨基处于游离态以利于亲核攻击。然后将AF488-NHS溶液缓慢加入到肽溶液中，在室温或低温条件下轻轻搅拌反应若干小时，使NHS活性酯与肽链氨基充分发生酰胺化反应，生成稳定的AF488-Angiopep-2偶联产物。

在反应过程中，需要控制荧光染料与肽链的摩尔比，以实现适当标记密度，避免过度标记造成肽功能受损或荧光猝灭。同时，反应体系通常避光操作，以保护AF488的荧光性能。反应完成后，体系中仍含有未反应的AF488-NHS、缓冲盐及副产物，这些杂质会影响后续应用和实验准确性，因此必须进行纯化。

纯化过程常采用高效液相色谱（HPLC）或透析法。对于HPLC纯化，可使用反相C18柱，通过水/乙腈梯度洗脱体系分离AF488-Angiopep-2与未反应染料和小分子杂质。纯化过程中，通过检测紫外吸收和荧光信号，可准确监控产物洗脱情况，收集纯化后的峰组分。纯化后的AF488-Angiopep-2通常通过冻干获得干粉形式，以便长期储存和后续使用。透析纯化也可用于去除低分子量杂质，通过选择合适的分子量截断膜，将未反应的AF488-NHS及小分子副产物排出，同时保留偶联肽。

纯化后的AF488-Angiopep-2具有高纯度、良好的水溶性和稳定性，可直接用于体外细胞实验或体内成像研究。在实验应用中，其荧光信号可用于追踪Angiopep-2的细胞摄取、内化路径及穿过血脑屏障的动力学分析。偶联过程中生成的酰胺键稳定且化学性质温和，不会对肽链功能造成明显影响，从而保证其靶向能力和生物活性。

总体而言，AF488-Angiopep-2 是一种结合AF488荧光标记与Angiopep-2靶向功能的小分子肽探针。其合成基于NHS活性酯与肽氨基的酰胺化反应，条件温和、选择性高；纯化采用HPLC或透析方法，可获得高纯度产物。AF488-Angiopep-2在药物递送、脑靶向研究、荧光追踪和成像分析中提供了高效、可控、可靠的实验手段，是现代生物化学与分子探针研究的重要工具。

产品名称：AF488-Angiopep-2

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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