FITC-Bufotaline，异硫氰酸标记蟾毒它灵的反应机理

FITC-Bufotaline是一种将蟾毒它灵（Bufotaline）与异硫氰酸荧光素（FITC）共价连接形成的分子探针，结合了Bufotaline的甾体结构和FITC的绿色荧光特性，使其能够在分子实验和细胞分析中实现可视化标记与追踪。Bufotaline属于甾体类化合物，分子中含有羟基和胺基等活性官能团，可作为化学偶联的反应位点。FITC是一种广泛使用的荧光染料，其激发波长约为490纳米，发射波长约为520纳米，光稳定性良好，可提供强烈的荧光信号，用于分子检测和定量分析。FITC-Bufotaline通过异硫氰酸基与Bufotaline分子中的氨基或羟基发生共价结合形成稳定的化学连接，同时保留Bufotaline的核心甾体结构，实现荧光标记和分子追踪。该分子在有机溶剂和缓冲液中具有良好溶解性，可通过少量DMSO或PBS缓冲液辅助溶解形成均一溶液，适合用于体外实验和荧光检测。结构可通过核磁共振、质谱及高效液相色谱进行确认，以确保偶联成功并评估产物纯度。

FITC-Bufotaline的反应机理主要基于异硫氰酸基的亲核加成反应。异硫氰酸基（–N=C=S）为活泼的电子缺陷中心，能够与含有孤对电子的亲核基团反应。Bufotaline分子中的氨基（–NH₂）是最常用的反应位点，其孤对电子进攻异硫氰酸基中的碳原子，形成稳定的硫脲键（–NH–C(=S)–NH–）结构，从而实现荧光标记。若Bufotaline分子中含有羟基（–OH），在适当碱性条件下，羟基可以被去质子化形成烷氧负离子（–O⁻），作为亲核试剂同样可与异硫氰酸基发生加成反应，生成酯化的硫代碳酰键，但相对效率较低，通常以氨基反应为主。该偶联反应一般在弱碱性缓冲体系中进行，常用碱性试剂如碳酸氢钠或三乙胺（TEA），可去质子化亲核基团，提高反应速率。反应温度一般控制在室温至轻微升温范围（25–37℃），避免FITC分子或Bufotaline骨架降解。反应完成后，通过薄层色谱或高效液相色谱监控产物生成情况，待原料峰消失且新产物峰出现后进行纯化，常用方法包括硅胶柱层析或反相HPLC，梯度洗脱体系可采用甲醇-水或乙腈-水，以去除未反应染料及副产物。纯化后的FITC-Bufotaline可冻干保存，避光和低温环境下稳定，可长期使用而荧光信号保持良好。总的来说，FITC-Bufotaline是一种通过Bufotaline与FITC偶联形成的功能分子，其反应机理基于异硫氰酸基与氨基或羟基的亲核加成反应，在弱碱性条件下进行，形成稳定的硫脲键或酯化衍生物，实现荧光标记。该探针可用于分子追踪、细胞摄取分析、结合研究及荧光检测，为化学研究和分子实验提供可视化和定量的手段，同时兼具结构稳定性和实验可操作性，可在多种体外实验平台中广泛应用。

产品名称：FITC-Bufotaline

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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