AF488 NHS Ester，CAS号：1374019-99-4的光学性质

AF488 NHS Ester（CAS号1374019-99-4）是一种功能性荧光标记试剂，由Alexa Fluor 488荧光核心和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活性酯组成。Alexa Fluor 488属于绿色荧光染料，激发峰约为495纳米，发射峰约为519纳米，具有高量子产率、良好光稳定性以及低光漂白特性。NHS酯末端为分子提供高度选择性的化学活性，可与伯胺（–NH₂）官能团发生共价偶联，生成稳定酰胺键。这使AF488 NHS Ester广泛应用于蛋白质、多肽、抗体及其他含氨基生物分子的标记、荧光探针构建和分子成像研究。

化学反应原理

AF488 NHS Ester的反应机理核心是NHS酯与伯胺的亲核加成-取代反应。这一反应具有高选择性、温和条件和可控性，使其在化学和生物实验中表现出广泛适用性。具体反应原理可分为以下几个步骤：

1. NHS酯活性及亲核攻击
   NHS酯是一种羧酸活化衍生物，其酰基碳原子带有部分正电荷，易受到亲核试剂攻击。伯胺分子中的氮原子孤对电子作为亲核试剂，能够进攻NHS酯的羰基碳。这个步骤形成一个四面体中间体，是整个反应的速控步骤。反应速率受溶液pH、温度以及底物浓度影响。通常在中性或弱碱性缓冲液（pH 7.0–8.5）中进行，可保证伯胺的亲核性最大化，同时避免NHS酯的水解。

2. 四面体中间体形成
   在伯胺进攻酰基碳原子后，形成一个四面体过渡状态。此中间体包含原NHS酯碳、伯胺氮原子和NHS离去基。四面体结构的稳定性受到溶剂极性和缓冲液环境的影响，通常在水相或缓冲液中迅速重排以释放NHS离去基。

3. 离去基脱离与酰胺键生成
   四面体中间体通过NHS离去基脱离形成稳定酰胺键。NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）离去能力强，使反应在室温下即可高效完成。酰胺键的形成是共价反应的最终产物，荧光团与蛋白质、多肽或抗体牢固连接，标记稳定，不易在生物体系中脱落。

4. 反应条件对效率的影响

• pH值：中性至弱碱性环境最适合反应。低pH会抑制伯胺亲核性，高pH可能加速水解。

• 溶剂：反应可在水相或含少量极性有机溶剂（如DMSO、DMF）体系中进行，以溶解底物或调节反应性。

• 温度：室温或低温（4–25摄氏度）进行反应，有助于保持荧光团和生物分子的稳定性。

• 摩尔比：NHS酯略过量使用以确保标记充分；对敏感蛋白质，可控制摩尔比以减少多点偶联导致功能损失。

1. 副反应控制
   NHS酯在水相中会被水水解生成羧酸，因此反应需迅速且避光操作，以防荧光团降解或标记效率下降。通过优化pH、温度和摩尔比，可减少副反应，提高目标分子特异性标记效率。

2. 光学性质与反应优势
   AF488 NHS Ester的荧光团具有高亮度和光稳定性，在反应过程中不易漂白。反应完成后，荧光团与生物分子形成稳定结合，可用于长期成像和多通道实验。其发射波长位于绿色光区，便于与其他荧光染料组合，实现多组分追踪和FRET实验。

产品名称：AF488 NHS Ester

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

FITC-Glucose  荧光素标记葡萄糖

FITC-Glutamine 荧光素谷氨酰胺

FITC-Glycocholic acid 荧光素标记甘氨胆酸

FITC-Gypsogenin 荧光素标记丝石竹皂苷元

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09