AF430 Conjugate Streptavidin，荧光染料 Alexa Fluor 430 链霉亲和素的分子检测及生物成像

AF430 Conjugate Streptavidin 是一种由链霉亲和素（Streptavidin, SA）与荧光染料 Alexa Fluor 430（AF430）共价偶联形成的荧光标记蛋白。链霉亲和素是一种四聚体蛋白，具有极高的生物素结合亲和力（Kd ≈ 10^-15 M），能够特异性结合生物素化分子，而 AF430 是一种水溶性蓝绿色荧光染料，激发波长约为 430 纳米，发射波长约为 540 纳米，具有高光稳定性和良好的量子产率。AF430 Conjugate Streptavidin 结合了链霉亲和素的生物素结合能力与 AF430 的光学特性，可用于免疫标记、分子检测及生物成像。

AF430 Conjugate Streptavidin 的制备方法主要包括蛋白质缓冲准备、荧光染料活化、偶联反应和纯化四个关键步骤。首先，需要对链霉亲和素进行缓冲液调整，通常使用 pH 7.5–8.5 的碳酸盐或磷酸盐缓冲液，以保证赖氨酸残基氨基的亲核性，同时避免蛋白质变性。在缓冲液中溶解的链霉亲和素四聚体提供了多个可反应位点，为荧光染料偶联奠定基础。

荧光染料部分的准备是制备过程的核心。AF430 通常以 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯的形式提供活性官能团，可与蛋白质中的伯胺或仲胺反应形成稳定的酰胺键。在使用前，AF430 NHS 酯需要在无水或低水含量的缓冲体系中溶解，以防止水解导致活性下降。通过适当的摩尔比计算，将荧光染料与链霉亲和素混合，为偶联反应提供条件。

偶联反应在温和条件下进行，一般在室温或低温（4–25 摄氏度）下持续 30 分钟至数小时，避光操作以防染料光漂白。偶联过程中，链霉亲和素表面的赖氨酸残基氨基作为亲核试剂攻击 AF430 NHS 酯的碳原子，形成酰胺键，同时释放 N-羟基琥珀酰亚胺。这种反应具有高度选择性，只与蛋白氨基反应，对蛋白的糖结合位点影响较小，从而保持链霉亲和素的生物活性。

反应完成后，需要对偶联产物进行纯化，以去除未反应的 AF430 和低分子量副产物。常用的方法包括透析、凝胶过滤或层析技术。透析可利用分子量截断膜去除小分子杂质，而凝胶过滤可根据分子量差异实现高效分离。纯化后的 AF430 Conjugate Streptavidin 水溶性良好，荧光分布均匀，并保持高亲和力结合生物素化分子。

在整个制备过程中，偶联比例和反应条件的控制十分重要。过量染料可能导致蛋白质构象改变，影响生物素结合能力；染料不足则导致荧光信号较弱。通过优化摩尔比、反应时间和缓冲条件，可以获得既高荧光强度又保持蛋白活性的标记产物。此外，偶联产物的稳定性通常通过光照、温度和 pH 控制来保证，以适应后续实验的需求。

产物的表征通常通过紫外-可见光谱测定染料吸收峰、荧光光谱验证发射特性，以及 SDS-PAGE 或质谱分析蛋白质偶联情况。通过这些表征手段，可以确认 AF430 Conjugate Streptavidin 的荧光性能、蛋白完整性及偶联效率，从而确保其在免疫标记、分子捕获、流式细胞分析及生物成像实验中的可靠应用。

产品名称：AF430 Conjugate Streptavidin 

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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