CF594 conjugate Streptavidin，CF594 荧光染料标记链霉亲和素的偶联机理

CF594 conjugate Streptavidin 是一种将 CF594 荧光染料与链霉亲和素（Streptavidin, SA）共价偶联形成的生物功能分子。链霉亲和素是一种四聚体蛋白，每个亚基含有高亲和力的生物素结合位点（Kd ≈ 10^-15 M），能够与生物素化分子形成稳定复合物；CF594 是一种红色荧光染料，激发波长约为 590 纳米，发射波长约为 615 纳米，具有高量子产率、光稳定性好和水溶性强等特性。通过将 CF594 偶联到 SA，可同时实现荧光可视化与高亲和力生物素结合功能，用于生物标记、分子追踪及药物递送系统研究。其反应机理体现了化学偶联的选择性、稳定性及生物功能保留。

CF594 conjugate Streptavidin 的偶联机理主要依赖于染料的活化官能团与蛋白质赖氨酸侧链氨基发生亲核加成反应。CF594 通常以 NHS 酯或类似活化羧基形式存在，其羧基碳原子对亲核试剂具有高度活性。在反应过程中，SA 中赖氨酸残基的 ε-氨基作为亲核试剂攻击 CF594 的羧基碳，形成稳定的酰胺键，同时释放 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）作为副产物。这一反应属于典型的亲核取代反应，选择性高，在温和的水性缓冲条件下即可进行，而不会破坏蛋白质的天然构象。

反应机理的关键环节是羧基活化和亲核攻击的协同作用。首先，CF594 的羧基通过 NHS 或其他活化试剂形成活化酯，提高了碳原子的电子受体性，使赖氨酸氨基能够有效进行亲核进攻。随后，赖氨酸氨基的孤对电子攻击碳原子，形成酰胺键，同时脱去 NHS，完成共价连接。由于酰胺键在水性环境中高度稳定，这种偶联方式保证了染料与蛋白质之间持久的结合，同时减少了染料在实验过程中脱落或迁移的风险。

在偶联过程中，pH、温度和摩尔比等因素对反应机理的效率和结果有显著影响。反应通常在弱碱性缓冲液（pH 7.5–8.5）中进行，以保证赖氨酸氨基非质子化，提高亲核性，同时减缓 NHS 酯水解速度。温和的室温或低温条件可防止 SA 构象改变或聚集，维持蛋白质功能。染料与蛋白质的摩尔比调控有助于平衡标记度与蛋白质活性，避免过度标记造成蛋白质功能丧失或聚集。

此外，偶联反应机理还包括反应速率和空间选择性的调控。NHS 酯与氨基反应速率较快，因此通常可以在数小时内完成偶联。蛋白质表面赖氨酸残基的空间分布决定了染料偶联的位置和数量，这影响标记均一性和生物素结合能力。通过合理控制反应条件，可以最大限度保留 SA 四价生物素结合位点的功能，同时获得均一、高亮度的荧光标记。

偶联完成后，产物通常通过凝胶过滤、透析或层析纯化，以去除未反应染料和副产物，保证最终复合物的水溶性和稳定性。纯化后的 CF594 conjugate Streptavidin 兼具高亮度红色荧光和高亲和力结合能力，可用于免疫荧光标记、生物分子追踪、药物载体评估及多色成像实验。

综上所述，CF594 conjugate Streptavidin 的反应机理核心是 CF594 活化羧基与 SA 赖氨酸氨基的亲核加成形成稳定酰胺键。反应条件温和，pH 弱碱性，温度控制适中，摩尔比精确调控，使偶联反应选择性高、稳定性好，同时保持 SA 生物素结合功能。通过这一机理，CF594 conjugate Streptavidin 在荧光标记和分子追踪实验中能够提供高亮度、稳定可靠的红色荧光信号，为细胞生物学、蛋白质研究及药物递送系统评价提供可靠化学工具。

产品名称：CF594 conjugate Streptavidin

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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