产品名称:Hoechst 33342,赫斯特荧光染料 33342
1. 分子结构与化学特性
核心结构:分子式为C₂₇H₂₈N₆O·3HCl·3H₂O,分子量约561.93,CAS号23491-52-3。属于苯并咪唑类荧光染料,通过非嵌入方式与DNA的AT富集区域小沟结合,特异性标记细胞核DNA。
化学活性:可穿透细胞膜,与双链DNA结合后发出蓝紫色荧光(激发波长350-360 nm,发射波长460-461 nm)。对活细胞和固定细胞均适用,且对细胞生理功能影响较小。
2. 荧光特性与优势
高灵敏度与特异性:荧光强度与DNA含量成正比,适用于细胞核染色、细胞周期分析(G1/S/G2期区分)及凋亡检测。凋亡细胞因膜通透性增加和DNA结构改变,荧光强度显著高于正常细胞。
光谱兼容性:发射波长位于蓝紫光区,可与绿色/红色荧光染料(如FITC、PI)联用进行多色标记,避免串扰。
光稳定性:抗光漂白能力强,适合长时间成像和动态追踪。
3. 应用场景
细胞核染色与形态学分析:荧光显微镜下观察细胞核形态(如凋亡细胞的致密浓染或碎片化),用于细胞凋亡、染色体计数、核复染色(如免疫荧光共定位)。
流式细胞术:结合PI/EB进行双染色,区分活细胞(低蓝/低红)、凋亡细胞(高蓝/低红)和坏死细胞(低蓝/高红)。细胞周期分析中,通过DNA含量定量划分G1/S/G2期。
药物开发与疾病研究:评估抗肿瘤药物诱导的凋亡效果,研究神经退行性疾病中的核异常,或用于活细胞动态追踪(如钙离子波动、蛋白转运)。
4. 反应条件与操作规范
浓度与孵育:工作浓度1-10 μg/mL,室温或37℃避光孵育10-30分钟。贴壁细胞需覆盖染色液,悬浮细胞需3倍体积染色液混匀。
洗涤与纯化:孵育后用PBS/TBST洗涤2-3次,去除未结合染料。固定细胞需先洗涤去除固定剂,再进行染色。
仪器设置:荧光显微镜使用紫外光源(350-360 nm激发),流式细胞仪配置相应滤光片(如405 nm激光激发,450 nm带通滤光片)。

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西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
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