产品名称:TMR-ConA,四甲基罗丹明标记的刀豆蛋白 A
TMR-ConA(四甲基罗丹明标记的刀豆蛋白 A)是一款将四甲基罗丹明(TMR)荧光染料与刀豆蛋白 A(ConA)通过共价键结合形成的荧光探针,兼具 ConA 的生物识别功能与 TMR 的荧光成像特性,在细胞生物学与分子生物学领域,主要用于糖类分子的定位、检测及功能研究。
首先从核心成分特性来看,刀豆蛋白 A(ConA)是从刀豆种子中提取的一种植物凝集素,分子质量约为 102kDa,由四个相同亚基组成,每个亚基都含有一个糖类结合位点,对 α-D - 甘露糖和 α-D - 葡萄糖及其衍生物具有高度特异性结合能力,且结合亲和力强(KD 值约为 10-6-10-7mol/L)。ConA 的这一特性使其成为研究细胞表面糖基化修饰、糖蛋白分布及细胞间糖介导相互作用的理想工具。而四甲基罗丹明(TMR)作为常用荧光染料,激发波长为 547nm,发射波长为 573nm,发出明亮的红色荧光,具有光稳定性好(光漂白速率低)、荧光量子产率高(约 0.57)、水溶性佳等优势,且其荧光信号不易受细胞 autofluorescence(自发荧光)干扰,能清晰显示靶标位置。
在制备工艺上,TMR-ConA 通过化学偶联反应合成:通常选择 TMR 的 NHS 酯衍生物(TMR-NHS ester)作为标记试剂,其可与 ConA 表面赖氨酸残基上的氨基(-NH2)在中性条件下发生酰胺化反应,形成稳定的共价键。为确保标记效果,反应过程中需严格控制染料与 ConA 的摩尔比(通常为 5:1-10:1)、反应温度(25-37℃)及反应时间(1-2 小时),避免过量染料导致 ConA 的糖类结合活性受损。反应结束后,通过凝胶过滤层析(如 Sephadex G-25 柱)去除未结合的游离 TMR 染料,获得高纯度的 TMR-ConA,经检测,其标记效率通常为每个 ConA 分子结合 3-6 个 TMR 分子,且不影响 ConA 的生物活性。
在应用场景中,TMR-ConA 的用途极为广泛:在细胞表面糖基化研究中,可与细胞表面富含甘露糖 / 葡萄糖的糖蛋白、糖脂结合,通过荧光显微镜观察细胞表面糖基的分布情况,还可用于比较正常细胞与肿瘤细胞表面糖基化修饰的差异;在细胞内糖转运研究中,将 TMR-ConA 与细胞共孵育后,可追踪糖类分子在细胞内的转运路径,分析高尔基体、内质网等细胞器在糖代谢中的作用;在病毒感染机制研究中,部分病毒(如流感病毒)通过与宿主细胞表面的糖蛋白结合实现感染,TMR-ConA 可作为竞争抑制剂,辅助研究病毒与宿主细胞的相互作用;在组织病理学研究中,TMR-ConA 可用于组织切片的染色,观察不同组织中糖蛋白的表达分布,为疾病诊断提供参考。
在使用注意事项上,TMR-ConA 需在 4℃避光储存,避免反复冻融导致蛋白变性;使用前需用缓冲液(如 PBS)稀释至适宜浓度(通常为 10-50μg/mL),并根据实验需求调整孵育时间(15-60 分钟);由于 ConA 具有一定的细胞毒性,高浓度长时间孵育可能影响细胞活性,因此需通过预实验确定最佳反应条件;此外,为避免非特异性结合,实验中可设置空白对照组(仅加入缓冲液)和竞争对照组(加入过量甘露糖,阻断 ConA 与糖基的结合),确保实验结果的特异性。
产地:西安
规格:50mg 100mg 500mg
纯度:95%
状态:固体/粉末
储藏条件:冷藏
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

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小编:HLL 2025年11月25日




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