产品名称：FITC-Phalloidin的实验操作要点

1. 结构与原理

Phalloidin：源自毒蘑菇Amanita phalloides的环状七肽毒素，以高亲和力（Kd≈20 nM）选择性结合丝状肌动蛋白（F-actin），不结合单体肌动蛋白（G-actin），可稳定微丝结构并抑制其解聚。

FITC：荧光标记物，激发波长495-496 nm，发射绿色荧光（513-516 nm），适配荧光显微镜的FITC通道。

复合物特性：分子量约1177.3 Da，水溶性，直径约12-15 Å，对F-actin的特异性结合无物种差异，适用于动植物及微生物细胞。

2. 生物学应用

核心用途：标记细胞骨架中的F-actin，用于观察细胞形态、动态变化（如伪足形成、细胞迁移）、细胞分裂及组织结构。

实验场景：

固定细胞/组织切片（需甲醛或戊二醛固定，避免甲醇破坏肌动蛋白）。

细胞培养物、无细胞体系（如纯化的肌动蛋白纤维）。

多色荧光成像（常与DAPI、TRITC等联用，标记细胞核或其它结构）。

定量分析：通过荧光强度量化F-actin含量，评估药物/基因对细胞骨架的影响。

3. 实验操作要点

储存与配制：

冻干粉或DMSO/甲醇溶液形式，-20℃避光保存（有效期约1年）。

工作液浓度通常为80-200 nM，需用含1% BSA的PBS稀释以减少非特异性结合。

染色步骤（典型流程）：

细胞固定（4%多聚甲醛，室温10-15分钟），避免甲醇固定剂。

透化处理（0.5% Triton X-100，5分钟）。

FITC-Phalloidin孵育（室温避光30分钟，可优化浓度与时间）。

洗涤（PBS清洗3次），封片（抗荧光淬灭剂+DAPI复染细胞核）。

注意事项：

Phalloidin有毒（LD₅₀≈2 mg/kg），操作需戴手套、穿实验服。

避免固定剂含甲醇，防止肌动蛋白结构破坏。

工作液现配现用，避免反复冻融。

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