产品名称:Annexin V FITC的核心结构与原理
核心结构与原理
Annexin V特性:钙离子依赖性磷脂结合蛋白(分子量约35-36 kDa),特异性识别磷脂酰丝氨酸(PS)。在正常细胞中,PS位于细胞膜内侧;凋亡早期,PS外翻至细胞膜外侧,成为Annexin V的结合靶点。
FITC标记:荧光素异硫氰酸酯(FITC)通过共价偶联至Annexin V,赋予绿色荧光(激发495 nm,发射525 nm),适配荧光显微镜/流式细胞仪的FITC通道。
复合物特性:偶联后保留Annexin V的PS结合活性,需1-2 mM Ca²⁺维持结合能力;水溶性良好,-20℃避光保存,避免反复冻融。
生物学应用场景
凋亡检测:
早期凋亡:Annexin V FITC结合外翻PS,标记凋亡早期细胞;联合碘化丙啶(PI)可区分凋亡(Annexin V⁺/PI⁻)与坏死(Annexin V⁺/PI⁺)细胞。
流式细胞术:定量分析细胞凋亡比例,监测药物/基因干预对细胞存活的影响。
荧光显微镜:可视化凋亡细胞在组织或培养中的分布。
扩展应用:
血小板活化研究(PS外翻是活化标志)、凝血机制分析、细胞膜动态研究。
与线粒体膜电位探针(如JC-1)、caspase活性染料联用,多维度评估凋亡进程。
实验操作要点
染色流程:
细胞处理:收集细胞(贴壁细胞需胰酶消化),PBS洗涤,离心去上清。
结合缓冲液重悬:用含1-2 mM CaCl₂的缓冲液重悬细胞(浓度1×10⁶ cells/mL)。
染色:加入Annexin V FITC(终浓度5-10 μL/mL),避光室温孵育10-15分钟;若需区分凋亡/坏死,同步加入PI(终浓度5 μg/mL)。
上机检测:流式细胞仪立即分析(避免荧光淬灭),荧光显微镜需抗淬灭封片剂。
注意事项:
严格依赖Ca²⁺,缓冲液需现配现用;避免EDTA等螯合剂干扰。
操作需避光、低温;设置未染色/单染对照(如Annexin V单染、PI单染)。
细胞状态需健康(避免过度消化或机械损伤导致假阳性)。

关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
我们能提供的产品:
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DSPE-PEG-DOTA,MW;5k二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-四氮杂环配体
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