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Click-iT Plus EdU AF 350 流式细胞术试剂盒的核心优势
发布时间:2025-11-28     作者:wyh   分享到:

产品名称:Click-iT Plus EdU AF 350 流式细胞术试剂盒的核心优势

1. 核心原理与结构

EdU标记机制:EdU(5-乙炔基-2'-脱氧尿苷)作为胸苷类似物,在细胞DNA合成期(S期)主动掺入新合成的DNA链,替代天然脱氧尿苷(dU),实现增殖细胞的特异性标记。

点击化学反应:通过铜催化反应,EdU的乙炔基与Alexa Fluor 350荧光染料的叠氮基团共价结合,形成稳定的三唑环结构,发出蓝色荧光(激发波长350 nm,发射波长438 nm)。

荧光特性:Alexa Fluor 350为蓝色荧光染料,需紫外激光(UV激光器)激发,发射光谱与常见染料(如FITC、PE)无重叠,支持多色流式检测。

2. 核心优势

温和高效:相比传统BrdU法,无需DNA变性(如HCl处理或加热),避免细胞周期分布失真和抗原破坏,保留细胞活性及表位完整性。

高灵敏度与特异性:可检测低水平DNA合成,适用于少量增殖细胞(如肿瘤干细胞、免疫细胞),信号稳定且背景低。

快速操作:全程约60分钟,反应在生理条件下进行,减少细胞损伤,兼容细胞周期染料(如PI、DAPI)和表面/胞内抗体标记,支持多参数分析。

多色兼容性:Alexa Fluor 350光谱与绿色/红色荧光染料分离良好,适用于多色流式细胞术(如联合CD45、Ki67等标记)。

3. 实验流程关键步骤

细胞培养与EdU标记:细胞接种于培养板,加入含EdU的培养基孵育(浓度需预实验优化),标记S期增殖细胞。

固定与透化:4%多聚甲醛固定15分钟,0.5% Triton X-100透化20分钟,促进试剂渗透。

点击反应:配制含Alexa Fluor 350叠氮物、铜保护剂及反应缓冲液的混合液,室温避光孵育30分钟,完成荧光标记。

流式分析:洗涤后重悬细胞,经40μm滤网过滤,使用流式细胞仪(配备UV激光器)检测蓝色荧光信号,结合阴性/阳性对照调整参数。

Click-iT Plus EdU AF 350 流式细胞术试剂盒

关于我们:

西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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