产品名称:Casein-FITC Conjugate的功能验证与应用场景
1. 结构组成与荧光特性
Casein(酪蛋白):磷蛋白,常见于牛奶中,含丰富氨基(-NH₂),具有乳化、凝胶形成等生物活性,常用于食品、医药及生物标记领域。
FITC(异硫氰酸荧光素):绿色荧光染料,激发波长495 nm,发射波长520 nm,具有高量子产率、良好的光稳定性,适用于荧光成像与追踪。
2. 偶联方法与反应机制
偶联原理
化学键形成:FITC的异硫氰酸基团(-N=C=S)与Casein的氨基(-NH₂)在碱性条件(pH 9.0,25℃)下发生亲核加成反应,形成稳定的硫脲键(-NH-C(O)-S-)。
反应优化:需避光操作以防止荧光淬灭,控制pH与温度以保留Casein的生物活性。反应后通过透析或层析纯化,去除未反应FITC及副产物。
标记效率验证
荧光特性:通过荧光分光光度计检测激发/发射波长,确认FITC荧光特性保留。
生物活性:通过乳化实验、凝胶形成实验验证Casein的生物活性是否受影响,如乳化稳定性、凝胶强度等。
3. 功能验证与应用场景
功能验证
荧光标记效率:通过紫外-可见光谱或荧光强度测定,评估标记产物的荧光亮度与稳定性。
生物活性保留:通过生物化学实验(如乳化实验)验证Casein的生物活性是否保留,确保其功能不受偶联影响。
安全性评估:通过细胞毒性实验(如MTT法)确认标记产物对细胞的低毒性,确保生物相容性。
应用场景
细胞成像:用于标记细胞表面蛋白或细胞内结构,研究细胞信号传导、迁移及分化过程。
流式细胞术:通过荧光标记区分细胞亚群,进行免疫表型分析或细胞周期检测。
免疫组化(IHC):用于组织切片中特定蛋白的定位与定量,辅助病理诊断。
蛋白质相互作用研究:通过荧光标记追踪Casein与其他蛋白质的相互作用,研究蛋白质复合物形成与功能。
食品与医药研究:用于食品中蛋白质的追踪、药物递送系统的开发及生物活性物质的标记。

关于我们:
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