AF488-Vancomycin，AF488标记万古霉素的表征方法

AF488-Vancomycin是一种荧光标记的糖肽类抗生素化合物，由水溶性荧光染料Alexa Fluor 488（AF488）与万古霉素（Vancomycin）通过共价偶联形成。AF488具有吸收波长约495 nm、发射波长约519 nm的特性，其荧光信号稳定且水溶性良好。通过与万古霉素结合，AF488-Vancomycin能够在保持原分子化学结构及功能特性基础上，实现可检测的荧光标记功能，为体外药物行为追踪、分子分布研究以及生物实验提供可视化工具。

万古霉素是一种复杂的糖肽类抗生素，结构上包含多肽环、氨基糖残基和多羟基官能团。其分子中的游离氨基和羟基可作为亲核位点，与AF488活性衍生物（如NHS酯或异硫氰酸酯）发生共价反应，形成稳定的酰胺键或酯键。偶联反应通常在弱碱性缓冲液（pH 7.2–8.5）中进行，并使用少量有机溶剂（如DMSO）以提高荧光染料溶解性。反应温度控制在室温至轻微加温（20–30℃）范围，避光处理以保持荧光稳定性和万古霉素结构完整性。

纯化方法

AF488-Vancomycin偶联反应完成后，需要通过纯化去除未反应的游离染料和副产物，以保证产物的纯度和实验应用可靠性。常用的纯化方法包括：

1. 透析
   利用分子量差异，通过适当孔径的透析膜将游离AF488和小分子副产物排出，保留标记万古霉素。透析通常在水或缓冲液中进行，持续数小时至数天，需定期更换透析液以提高纯化效率。

2. 凝胶过滤层析
   基于分子大小的分离方法，可以有效去除未反应的荧光染料和小分子杂质，同时回收AF488-Vancomycin。该方法适用于水溶性多肽或抗生素体系，分离过程中保持温和条件以避免分子降解。

3. 高效液相色谱（HPLC）
   反相HPLC或凝胶渗透HPLC可实现高纯度分离，同时允许在线检测荧光信号，以确认荧光染料的偶联效率。HPLC纯化后的产物可直接用于生物实验或储存。

表征方法

AF488-Vancomycin纯化后，需要通过多种方法进行表征，以验证结构完整性、荧光特性及纯度。常用表征方法包括：

1. 质谱（MS）
   用于确认AF488分子与万古霉素的共价结合，分析产物分子量是否符合预期，从而判断偶联效率和结构完整性。

2. 核磁共振（NMR）
   可用于分析氨基或羟基官能团的化学位移变化，确认AF488偶联位点及分子结构完整性。

3. 紫外-可见吸收光谱（UV-Vis）
   可测定AF488的特征吸收峰，结合万古霉素的特征吸收，可用于估算偶联比例和产物浓度。

4. 荧光光谱
   用于验证AF488标记产物的荧光性质，包括发射波长、荧光强度和量子产率，确保产物在实验条件下可用于荧光检测。

5. 电泳或凝胶分析
   对水溶性标记分子，可使用SDS-PAGE或聚丙烯酰胺凝胶电泳结合荧光扫描，观察标记均一性和纯化效果。

总的来说，AF488-Vancomycin是一种兼具荧光功能和生物分子活性的标记化合物，其纯化与表征通过透析、凝胶过滤、HPLC等方法去除杂质，并利用质谱、NMR、光谱及荧光分析确认结构完整性和荧光性能。这些步骤确保标记万古霉素在分子追踪、药物分布研究及生物实验中的可靠性和可重复性，为药物行为研究提供可视化和定量分析手段。

产品名称：AF488-Vancomycin

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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