CY3-PEP-1,花菁染料CY3标记穿膜肽PEP-1的物理与化学特性
CY3-PEP-1 是将 Cyanine 3(Cy3)荧光染料 与 穿膜肽 PEP-1 共价结合形成的标记分子。Cy3 是一种广泛使用的可见光荧光染料,具有良好的光学性能和适当的水溶性。PEP-1 是一种典型的穿膜肽,含有带正电荷的氨基酸序列,可在细胞膜上实现快速渗透和内化。通过 Cy3 对 PEP-1 进行荧光标记,可在体外或体内实验中追踪肽分子在细胞或组织中的分布和转运。
化学结构与特性
CY3-PEP-1 的分子结构由两部分组成:
Cy3 染料骨架:由两个吡咯环通过亚甲基链连接形成延长共轭体系,赋予分子可见光区的吸收(约 550 nm)和发射(约 570 nm)能力。标记分子呈橙红色荧光,可在荧光显微镜或光谱仪下检测。
PEP-1 肽链:PEP-1 通常含有正电荷氨基酸残基,可与 Cy3 的活性基团(如 NHS 酯或异氰酸酯)形成稳定的酰胺键。标记后的 CY3-PEP-1 保留肽的穿膜特性,同时具有荧光可检测性。
物理与化学特性
外观:橙红色粉末或固体,易溶于水、PBS 或极性有机溶剂(如 DMSO)。
光学性质:吸收峰约 550 nm,发射峰约 570 nm,发射光为橙红色。
稳定性:干燥条件下相对稳定,但在水溶液中 N-羟基酯标记部分可能发生水解,因此储存需低温避光。
反应性:Cy3 的活性酯基与 PEP-1 氨基反应形成酰胺键,标记效率依赖于 pH、溶剂及温度。
合成步骤
原料准备
PEP-1 肽粉末(含游离 N-端氨基或赖氨酸残基)
Cy3-NHS(活性酯形式)
极性无水溶剂(如 DMSO 或 DMF)
弱碱性缓冲液(如 0.1 M 碳酸盐缓冲液,pH 8.3)
催化剂:可加入微量三乙胺(TEA)
肽溶解与反应准备
将 PEP-1 溶解于弱碱性缓冲液中,保持 pH 在 8–9,确保氨基充分活化。
Cy3-NHS 预先溶解于 DMSO 或 DMF 中,避免水分造成活性酯水解。
标记反应
缓慢加入 Cy3 溶液至肽溶液中,同时轻轻搅拌均匀。
反应通常在室温或略低温(20–25°C)下进行 4–12 小时,避光操作以减少荧光损失。
可根据肽与 Cy3 摩尔比调整标记程度,常用肽:染料比为 1:1.2–1.5。
产物纯化
反应完成后,可通过高效液相色谱(HPLC)、透析或凝胶过滤去除未反应的游离 Cy3。
收集纯化后的 CY3-PEP-1,并在低温避光条件下干燥或冻干保存(-20°C)。
产物检测
紫外-可见光光谱(UV-Vis)确认 Cy3 吸收峰约 550 nm
荧光光谱检测发射峰约 570 nm
可通过质谱(MS)或毛细管电泳验证肽分子与 Cy3 的共价结合
应用特点
CY3-PEP-1 将荧光信号与穿膜肽功能结合,可用于多种实验场景:
细胞渗透研究:通过荧光显微观察 CY3-PEP-1 在细胞内分布和摄取动力学
蛋白质或核酸递送:可作为穿膜载体追踪分子运输
成像实验:结合共聚焦显微镜进行定量或定位分析
分子示踪与定量分析:荧光强度可用于半定量或定量肽的吸收及内化
产品名称:CY3-PEP-1
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09




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