CY5-Tetrodotoxin, CY5-TTX，CY5-河豚毒素的制备方法

CY5-河豚毒素（CY5-Tetrodotoxin, CY5-TTX） 是一种通过化学标记将长波长荧光染料 CY5 与氨基全氢喹唑啉型天然神经毒素河豚毒素（Tetrodotoxin, TTX）共价结合形成的复合分子。河豚毒素是一种低分子量的氨基全氢喹唑啉型化合物，结构高度极化，分子含有多个羟基、胺基及氧杂环，呈现显著水溶性和高生物活性。CY5 是一种长波长荧光染料，吸收峰约 650 nm，发射峰约 670 nm，荧光量子产率高、光稳定性好，将 CY5 与 TTX 共价连接后可实现毒素的可视化示踪、定量分析和分布研究，同时保持河豚毒素核心的化学和生物功能特性。

制备方法主要基于 CY5 活性基团与 TTX 分子上的胺基或羟基进行共价偶联。由于 TTX 分子含有多个官能团，制备过程需保证选择性连接，避免破坏分子核心结构。一般步骤包括：首先，在溶液体系中将 CY5 活性基团（如 NHS 酯或异硫氰酸基）溶解于适当的有机溶剂或混合溶剂中，保持干燥和避光条件；然后在缓冲体系中加入 TTX，使 CY5 的活性基团与 TTX 的胺基发生亲核加成反应，形成稳定的共价连接。反应通常在温和条件下进行（室温或低温），pH 调节在中性或弱碱性范围，以提高反应效率并保证 TTX 分子稳定。

为了确保高选择性和纯度，制备过程中通常采用缓冲体系与溶剂的合理选择。水溶性强的 TTX 可在磷酸盐缓冲液或碳酸盐缓冲液中溶解，而 CY5 活性基团在 DMF 或 DMSO 中可稳定存在。缓慢滴加或搅拌反应有助于均匀反应并减少副反应。为防止光解和分子降解，全程需避光操作，并保持反应体系温和。

纯化步骤是制备 CY5-TTX 的关键环节。反应完成后，需通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的 CY5、小分子杂质及副产物，得到高纯度复合物。纯化后的 CY5-TTX 分子均匀分散，水溶性良好，荧光性能稳定，可在水相或生物缓冲体系中进行分子示踪和定量分析。UV-Vis 和荧光光谱可用于确认标记成功，CY5 吸收峰约 650 nm，发射峰约 670 nm，同时保留 TTX 核心结构的特征吸收和化学稳定性。

反应特点与方法优势包括：1）利用 CY5 活性基团的高反应性与 TTX 分子胺基选择性结合；2）温和条件保护 TTX 核心结构，避免官能团降解或脱水；3）柔性连接子设计保证荧光端与 TTX 核心空间分离，防止猝灭效应并保留水溶性；4）纯化和光谱表征确保产物均一、荧光稳定、功能完整。

制备完成的 CY5-TTX 可用于细胞膜受体研究、神经信号通路示踪及分子动力学分析。通过 CY5 荧光信号，可在共聚焦显微镜或荧光光谱体系中观察河豚毒素在细胞膜、胞内及组织中的分布，为研究钠通道阻断、神经信号调控及靶向作用提供高灵敏度实验工具。同时，高水溶性和化学稳定性保证实验可重复性和可靠性。

产品名称：CY5-Tetrodotoxin

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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