产品名称:磷脂-聚乙二醇-多肽-水溶性CY5,DSPE-PEG-Peptide-CY5的纯化与验证策略
一、合成路径优化
反应条件设计:
pH控制:弱碱性条件(pH 7.5-8.5)促进NHS酯活性,避免酸性环境导致水解。
温度与时间:室温至37℃反应2-6小时,避免高温破坏荧光或生物活性。
催化剂选择:EDC/NHS用于羧基活化,DMAP作为碱催化剂;无铜点击化学(如DBCO-N3)避免金属毒性。
溶剂体系:无水DMF、氯仿或PBS缓冲液,兼顾溶解性与生物相容性。
分步合成策略:
DSPE-PEG偶联:DSPE-NHS酯与PEG-氨基在PBS中反应,形成DSPE-PEG。
PEG-多肽偶联:PEG-NHS酯与多肽的氨基在Tris缓冲液中反应,引入靶向肽。
多肽-CY5偶联:多肽的羧基与CY5-氨基通过EDC/NHS活化,生成稳定酰胺键。
二、纯化与验证策略
纯化方法:
色谱分离:反相HPLC(C18柱)分离偶联产物,乙腈/水梯度洗脱,监测650 nm波长,纯度≥95%。
凝胶过滤:Sephadex G-25或PD-10柱去除小分子杂质,确保分子量均一性。
透析/超滤:10 kDa截留膜去除游离染料或未反应试剂,减少非特异性信号。
验证手段:
结构确认:质谱(MALDI-TOF)确认分子量;¹H/¹³C NMR验证化学结构;FTIR检测酰胺键特征峰。
功能验证:
荧光特性:荧光光谱仪测定激发/发射波长及量子产率,评估荧光稳定性。
靶向性测试:流式细胞术或共聚焦显微镜量化细胞摄取效率,验证多肽靶向能力。
生物活性:细胞毒性测试(MTT/CCK-8)、酶活实验或动物模型验证递送效率与治疗效果。
三、生物活性与功能表现
靶向递送:多肽介导的主动靶向(如肿瘤细胞、神经元),结合PEG的“隐形”效应,减少网状内皮系统清除,延长体内半衰期。
生物成像:CY5的近红外荧光适用于深部组织成像,支持肿瘤诊断、血管成像及细胞追踪。
药物递送:包裹化疗药物、核酸或蛋白,实现靶向释放,提升治疗指数并减少副作用。
基因治疗:递送siRNA、mRNA或CRISPR/Cas9,结合多肽的穿透能力,增强基因转染效率。

关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
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