产品名称:荧光素异硫氰酸酯-丹参酸B,FITC-Salvianolic acid B的关键应用场景
1. 结构特性与化学设计
分子组成:由异硫氰酸荧光素(FITC)与丹参酸B(Salvianolic acid B,SalB)通过共价键连接。丹参酸B是丹参(Salvia miltiorrhiza)中的主要活性多酚类化合物,分子式为C₃₆H₃₀O₁₆,分子量718.62,结构含多个酚羟基、羧基及共轭双键系统。FITC通过异硫氰酸酯基团与丹参酸B的羟基或羧基反应,形成稳定的硫脲键或酯键,赋予复合物荧光特性(激发波长495nm,发射波长520nm)。
两亲性设计:复合物兼具亲水性(羧基端)与疏水性(FITC芳香环),适合生物介质分散,pH 4-8范围内荧光稳定,光稳定性良好,适用于长时间成像实验。
2. 合成方法与工艺优化
反应机制:FITC的异硫氰酸酯基团与丹参酸B的羟基/羧基在碱性条件(pH 8.0-9.5)下发生亲核取代反应。若丹参酸B无氨基,需通过EDC/NHS活化羧基,或利用羟基直接反应。
纯化与表征:采用透析、凝胶过滤(如Sephadex G25柱)或HPLC去除游离FITC和副产物,确保纯度>95%。通过质谱、红外光谱验证结构,F/P比值(荧光素与蛋白比例)控制在2-4以优化标记效率。
工艺优化:反应温度≤40℃,避光操作,惰性气体保护减少氧化;冻干粉末添加甘露醇/海藻糖作为保护剂,延长储存期(-20℃以下)。
3. 关键应用场景
生物成像与追踪:
细胞/组织成像:利用绿色荧光追踪丹参酸B在细胞内的分布、代谢及靶向作用(如线粒体功能研究),或在组织中观察药物递送路径。
疾病机制研究:在创伤性脑损伤(TBI)模型中,FITC-SalB可可视化其通过Nrf2/Prx2和Nrf2/TLR4/MyD88通路减轻氧化应激和炎症反应的过程。
药物动力学研究:追踪丹参酸B的吸收、分布、代谢和排泄(ADME)过程,评估其生物利用度和靶向效率。
纳米载体功能化:修饰脂质体、纳米颗粒或水凝胶,实现丹参酸B的靶向递送(如肿瘤或心血管疾病治疗)。
4. 稳定性与生物相容性
化学稳定性:在常规实验条件下(如pH 4-8、避光、低温)稳定,但需避免强酸/碱、高温或金属离子导致荧光淬灭。光稳定性通过化学修饰(如引入硫代乙酰基)或纳米载体保护进一步提升。
生物相容性:丹参酸B本身低毒,FITC标记后仍保持良好生物相容性,适用于活细胞实验及体内研究。代谢产物(如乙二醇、硫酸盐)经肾脏排泄,需监控长期使用下的蓄积风险。
安全性评估:通过MTT法、流式细胞术验证细胞毒性;动物实验中需评估免疫原性及遗传毒性。

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