荧光素酶激活蛋白-TATA，FAP-TATA，成纤维细胞活化蛋白，化学反应原理

英文名称：Fluorescent-Activated Protein-TATA (FAP-TATA)
中文名称：荧光素酶激活蛋白-TATA（成纤维细胞活化蛋白-TATA，FAP-TATA）

概述
FAP-TATA是一种融合蛋白衍生物，将成纤维细胞活化蛋白（Fibroblast Activation Protein, FAP）与TATA（Transcription Activator TATA-box binding domain）结构域连接。该融合蛋白可通过荧光素酶或荧光报告系统实现活性检测，用于细胞活化、信号传导和生物分子标记研究。FAP-TATA的设计兼顾生物功能性与可检测性，使其在细胞成像、信号调控及药物筛选中具有应用潜力。

化学结构与组成

• FAP结构域：FAP为丝氨酸蛋白酶家族成员，具有限制性酰肽酶活性，可识别并切割特定多肽序列。

• TATA结构域：TATA结合蛋白结构域是转录因子核心部分，能识别DNA启动子中的TATA盒序列，实现转录调控功能。

• 荧光素酶激活模块：通过将荧光素酶底物或衍生物与FAP-TATA偶联，可在FAP活化或TATA结合DNA时诱导荧光素酶信号产生，实现活性检测。

结构示意为：

• FAP-(Linker)-TATA-(Fluorescent Reporter)

该结构通过柔性连接链（Linker）连接各模块，保证蛋白折叠与功能完整，同时实现荧光素酶信号的有效输出。

化学反应原理

1. 蛋白质融合与共价修饰

• FAP-TATA通常通过重组DNA技术表达，融合蛋白在翻译后形成整体结构。

• 荧光素酶或其底物通过化学偶联或生物素-亲和素系统与融合蛋白连接。

• 化学偶联反应一般通过活性酯（如NHS-酯）与蛋白质氨基残基共价结合，生成稳定酰胺键。

2. 酶激活反应

• FAP具有特异性酰肽酶活性，可识别并切割底物上的特定序列。

• 当底物含有荧光素酶前体（substrate-labeled reporter）时，FAP切割导致前体活化，产生荧光信号。

• 荧光信号强度与FAP活性呈正相关，可实时反映蛋白激活水平。

3. TATA结合DNA的信号转导

• TATA结构域识别DNA启动子上的TATA序列，结合后可改变蛋白构象或激活下游转录。

• 荧光素酶模块可设计为构象敏感型（conformation-sensitive reporter），当TATA与DNA结合时，诱导荧光素酶底物的活化或荧光信号释放。

4. 反应条件与控制

• pH和缓冲体系：通常在生理条件（pH 7.2–7.4）下进行，保证蛋白结构稳定及酶活性维持。

• 温度：在室温或37℃条件下进行，模拟体内环境。

• 离子强度：适当的盐浓度保证蛋白稳定和DNA结合效率。

• 时间控制：荧光信号随反应时间增加而增强，可通过实时检测进行动态分析。

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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