CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite,CAL 荧光金 540 磷酰胺衍生物的制备方法

CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite（中文名称：CAL 荧光金 540 磷酰胺衍生物）是一种用于固相寡核苷酸合成的功能化荧光核苷酸中间体，其核心为 CAL Fluor Gold 540 荧光染料，通过柔性链与核苷骨架连接，并在末端引入 2-氰乙基二异丙基磷酰胺（phosphoramidite）官能团，使其可在固相寡核苷酸合成中高效偶联。CAL Fluor Gold 540 属于黄-橙色荧光染料，吸收峰约在 540 nm，发射峰约在 560 nm，具有高量子产率、良好光稳定性及水溶性优异，适用于寡核苷酸标记、分子探针、荧光成像和多重标记实验。

CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite 的制备方法通常包括三个主要步骤：荧光染料功能化、柔性链连接以及磷酰胺化活化。首先，将 CAL Fluor Gold 540 荧光染料通过羧基或氨基官能团进行活化，常采用 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化或其他适宜活化剂生成活性中间体。活化后的染料可与含有胺或羟基的长链柔性连接基（如 C6、C12 链）发生偶联反应，形成染料-链连接物。该反应在干燥的有机溶剂中进行，通常加入碱性催化剂（如 DIPEA）以促进偶联，并控制温度和反应时间以防止染料降解或副反应发生。

其次，将染料-链偶联物与核苷骨架结合，通常选择 5'-羟基端的胸腺嘧啶或其他核苷。在干燥有机溶剂中，通过碱性条件催化，染料-链与核苷羟基形成共价键，生成稳定的染料-核苷偶联物。该步骤确保染料与核酸链有一定的空间隔离，减少荧光淬灭和分子间干扰，同时保持核酸二级结构的完整性。

最后，将染料-核苷偶联物进行磷酰胺化处理，引入 2-氰乙基二异丙基磷酰胺活性基团，形成 CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite。磷酰化反应通常在干燥二氯甲烷或 DMF 中进行，并加入碱（如 DIPEA）以捕获反应产生的 HCl，反应温度一般控制在 0–5°C，以降低副反应风险。磷酰胺化完成后，经纯化（如硅胶柱层析或 HPLC 分离），获得高纯度的 CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite，可在固相合成中直接用于寡核苷酸标记。

制备过程中应注意染料的光敏感性和磷酰胺对水的敏感性。所有操作应在避光条件下进行，并使用干燥溶剂以保持化合物稳定性。纯化后的产物应低温避光保存，避免水分和氧化环境，以保证磷酰胺活性和荧光性能。最终产物具有模块化结构，荧光染料核心、柔性链以及末端磷酰胺的组合使其能够在寡核苷酸合成中高效、可控地整合，并保持光学性能稳定。

产品名称：CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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