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Alexa Fluor 532 偶联物的反应机制与优势
发布时间:2025-12-18     作者:wyh   分享到:

产品名称:Alexa Fluor 532 偶联物的反应机制与优势

反应机制与优势

偶联反应:在pH 7.0-8.5、室温至37℃条件下,活性基团与目标分子(如抗体、凝集素)特异性结合,反应时间30分钟至2小时。例如:

NHS酯:与赖氨酸残基的氨基反应,形成稳定偶联物(如Alexa Fluor 532-WGA)。

马来酰亚胺:与还原后的巯基反应,避免二硫键干扰(需提前用DTT/TCEP还原)。

核心优势:

高灵敏度与稳定性:光稳定性优于传统染料(如Cy3),抗光漂白能力强,适合长时间成像。

多色兼容性:发射光谱与AF488(绿)、DAPI(蓝)、AF594(红)等无重叠,适配多色荧光共定位。

生物相容性:水溶性设计减少非特异性吸附,适配活细胞/固定样本检测。

应用场景与案例

细胞与组织成像:

WGA标记:与小麦胚芽凝集素(WGA)偶联,特异性识别细胞膜糖基(如GlcNAc、唾液酸),用于细胞轮廓勾勒、糖代谢追踪(如神经元突触标记)。

免疫荧光:标记抗体检测低丰度靶标(如HER2、磷酸化蛋白),结合TSA技术实现单拷贝级信号放大。

流式细胞术与高通量检测:

增强细胞表面受体(如干细胞抗原)检测信号,提高稀有细胞分选精度。

适配生物芯片、ELISA等平台,提升蛋白/核酸检测灵敏度。

超分辨率显微镜:抗光漂白特性适配STORM/STED技术,实现纳米级分辨率成像(如细胞骨架、膜蛋白动态追踪)。

操作与安全要点

合成与纯化:

NHS酯法:在PBS/碳酸盐缓冲液中反应,通过凝胶过滤/透析去除游离染料。

TSA试剂:酪胺与AF532偶联后,需避光-20℃保存,避免反复冻融。

储存与使用:

固体/粉末形式需避光-20℃保存;溶液状态4℃保存不超过24小时。

反应体系需避光操作,防止染料光降解;使用后及时纯化(如HPLC、超滤)。

安全防护:佩戴丁腈手套、护目镜及实验室外套,通风橱中操作;仅限科研用途,不可用于人体。

Alexa Fluor 532 偶联物

关于我们:

西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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