您当前所在位置:首页 > 资讯信息 > 新品上市
Streptavidin,Alexa Fluor 546 conjugate的合成策略
发布时间:2025-12-24     作者:wyh   分享到:

产品名称:Streptavidin,Alexa Fluor 546 conjugate的合成策略

一、核心结构与化学组成

链霉亲和素(Streptavidin):

来源于链霉菌(Streptomyces avidinii)的四聚体蛋白,分子量约53-60 kDa,由四个相同亚基组成,每个亚基含159个氨基酸,形成β-桶状结构。

每个亚基可特异性结合一个生物素分子,四聚体共可结合四个生物素分子,形成高稳定性复合物(解离常数Kd≈10⁻¹⁴ M)。

Alexa Fluor 546 荧光染料:

橙红色荧光染料,激发波长556 nm,发射波长573 nm,荧光量子产率高,光稳定性强,pH不敏感(pH 4-10范围内荧光强度稳定)。

化学性质:属于磺化罗丹明衍生物,通过NHS酯与链霉亲和素的氨基(如赖氨酸残基)共价偶联,形成稳定的酰胺键。

偶联结构:

通过化学交联剂(如NHS酯)将Alexa Fluor 546共价连接到链霉亲和素表面氨基上,形成Streptavidin-Alexa Fluor 546 Conjugate,兼具高亲和力与荧光信号放大能力。

二、合成路径与关键控制参数

合成策略:

NHS酯偶联法:Alexa Fluor 546的NHS酯与链霉亲和素的氨基在碱性条件(pH 6.5-7.5)下反应,形成酰胺键。反应温度25-37℃,时间4-24小时,需避光防止荧光淬灭。

纯化步骤:透析(截留分子量3.5-10 kDa)、C18反相HPLC梯度洗脱或尺寸排阻色谱(SEC)去除未反应染料和杂质,纯度≥95%。

关键控制参数:

pH调控:活化阶段(如EDC/NHS活化)pH 4.5-6.0,偶联阶段pH 6.5-7.5,平衡羧基活化与氨基活性。

摩尔比优化:染料与蛋白摩尔比1:1至10:1,确保偶联效率同时保留生物素结合能力。

溶剂体系:水相(PBS、生理盐水)或极性有机溶剂(DMSO、DMF),无水条件用于EDC/NHS活化。

Streptavidin,Alexa Fluor 546 conjugate

关于我们:

西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


我们能提供的产品:

多肽标记高三尖杉酯碱丨多肽-Homoharringtonine/高三尖杉酯碱-多肽/高三尖杉酯碱偶联多肽

DSPE-PEG-COOH丨DSPE-PEG2000-COOH/DSPE-PEG-羧基/COOH-聚乙二醇-磷脂/羧基PEG磷脂DSPE

DSPE-PEG2000-大黄酸丨DSPE-PEG-Rhein/DSPE-PEG-大黄酸/大黄酸-聚乙二醇-磷脂/大黄酸PEG磷脂DSPE

大黄酸-PEG-NH2丨Rhein-PEG-NH2/大黄酸-聚乙二醇-氨基/NH2-PEG-Rhein/大黄酸PEG氨基NH2


库存查询