Cy5 NHS,花青素5号琥珀酰亚胺酯的反应机制
Cy5 NHS 是一种常用的活性荧光染料衍生物,其核心结构为花青素类多亚甲基共轭体系,末端通过活化酯形式引入 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)基团。该 NHS 酯结构使 Cy5 NHS 具备较高的亲核取代反应活性,能够在温和条件下与含氨基的分子发生定向偶联反应,广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸及其他生物大分子的标记。
从化学反应机理角度看,Cy5 NHS 的反应本质属于亲核酰基取代反应。在适宜的缓冲条件下(通常为弱碱性环境),目标分子中的一级胺或二级胺以未质子化形式存在,表现出较强的亲核性。当 Cy5 NHS 与含氨基底物接触时,氨基上的孤对电子会进攻 NHS 酯中羰基碳原子,形成一个不稳定的四面体中间体。
该四面体中间体随后发生重排,N-羟基琥珀酰亚胺作为离去基团被释放,羰基重新恢复为稳定结构,从而在 Cy5 分子与底物氨基之间形成稳定的酰胺键。这一过程不需要额外的催化剂,反应路径清晰,副反应较少,有利于获得结构明确的标记产物。
反应条件对偶联效率具有重要影响。pH 通常控制在 7.5–8.5 区间,在该范围内氨基具有足够的亲核活性,同时 NHS 酯的水解速率相对可控。若体系偏酸,氨基易被质子化,反应速率降低;若碱性过强,则可能加快 NHS 酯的非特异性水解,减少有效偶联比例。因此,合理的缓冲体系是保证反应可控性的关键因素。
在反应过程中,Cy5 的花青共轭结构并不直接参与化学键的形成,而是作为荧光功能单元保留其光学特性。NHS 酯仅作为“化学连接点”,实现染料与目标分子的共价结合。完成偶联后,Cy5 的荧光骨架仍保持完整,使标记分子具备稳定的光学信号输出能力。
产品名称:Cy5 NHS
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09




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