DBCO-NOTA，二苯并环辛炔-NOTA螯合剂的反应步骤

英文名称（English Name）：DBCO-NOTA (Dibenzocyclooctyne-NOTA)

中文名称（Chinese Name）：DBCO-NOTA（二苯并环辛炔-NOTA 螯合剂）

DBCO-NOTA 是由两类功能结构单元组成的双功能化分子。一端为 DBCO（二苯并环辛炔），属于应变促进型炔结构，具有较高的点击反应活性；另一端为 NOTA（1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸），是一种常用的小分子金属螯合剂，含有三个羧基和三个叔胺氮原子，可稳定配位多种金属离子。二者通过稳定的共价键连接，使该分子同时具备生物正交偶联能力与金属配位功能。

三、反应步骤概述（Reaction Steps Overview）

1. NOTA 的活化处理

NOTA 分子通常以含羧基形式存在，为实现与 DBCO 的共价连接，需要首先对 NOTA 的羧基进行活化。常用方式是利用碳二亚胺类试剂（如 EDC）与 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）协同作用，使羧基转化为活性酯中间体。该步骤一般在无水条件或弱酸性缓冲体系中进行，以保证活化效率。

2. DBCO 官能团的引入

DBCO 通常带有氨基或其他亲核官能团。活化后的 NOTA-NHS 酯可与 DBCO 上的氨基发生亲核取代反应，形成稳定的酰胺键。该反应在室温或略高温度下进行，溶剂多为 DMF、DMSO 或水/有机溶剂混合体系，以兼顾溶解性和反应效率。

3. 反应条件控制

反应过程中需控制 pH 在中性至弱碱性范围，避免 NOTA 螯合结构被破坏，同时保证 DBCO 环状炔结构的完整性。反应时间通常为数小时至过夜，以确保偶联充分进行。

4. 纯化步骤

反应完成后，通过反相柱层析或高效液相色谱去除未反应的原料和小分子副产物。纯化后的 DBCO-NOTA 通常表现为白色或浅色固体，可溶于水或极性有机溶剂。

5. 结构确认

采用核磁共振（¹H-NMR）、质谱（MS）及红外光谱（FTIR）对产物进行表征，用于确认 DBCO 与 NOTA 已成功连接且官能团完整。

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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