产品名称:AF594 N3,Alexa Fluor 594 叠氮
AF594 N3 是 Alexa Fluor 594 红色荧光团与叠氮基共价连接的点击化学荧光探针,属于 Thermo Fisher 公司开发的高性能红色荧光标记试剂,结合了 Alexa Fluor 594 优异的荧光性能和叠氮基的广谱点击化学活性,是细胞成像、免疫检测、活体浅层成像中应用最广泛的红色荧光探针之一。Alexa Fluor 594 的激发波长约 590 nm,发射波长约 617 nm,属于深红色荧光波段,其荧光光谱与绿色荧光(AF488)、蓝绿色荧光(AF430)、近红外荧光(Cy5)的光谱重叠极小,是多色荧光成像的核心红色荧光团,且该染料经过化学修饰,具有荧光量子产率高、消光系数大、光稳定性好的特点,水溶性极佳,无需有机助溶剂即可在水性缓冲体系中完成标记反应,荧光信号受 pH 值、离子强度、蛋白浓度的影响极小,在复杂的生物样品中仍能保持稳定的荧光发射。
叠氮基(-N3)作为该探针的唯一活性基团,通过亲水的 PEG 柔性连接臂与 AF594 荧光团连接,连接臂的设计既消除了荧光团对叠氮基的空间位阻,保证了点击化学反应的高效进行,又进一步提升了探针的水溶性和生物相容性,使探针能快速穿透细胞膜进入活细胞内,实现胞内靶点的原位标记。该叠氮基可与炔基、DBCO、BCN 等各类炔基衍生物发生高效的点击化学反应,其中与 DBCO 的 SPAAC 无铜点击化学反应是其最主要的应用方式,该反应在生理条件(pH 7.2-7.4、37℃)下即可快速进行,无需任何催化剂和辅助试剂,反应特异性高、产率高,且无有毒副产物生成,对活细胞、组织和活体动物无毒性,是活细胞原位标记和活体成像的理想反应体系。
AF594 N3 的核心应用覆盖细胞生物学、分子生物学、生物医学研究的多个领域,包括活细胞原位荧光标记、免疫荧光染色、抗体 / 蛋白荧光标记、核酸探针制备、活体浅层成像等,是多色荧光成像中不可或缺的红色荧光探针。在活细胞成像中,该探针可与 DBCO 修饰的细胞表面受体、胞内蛋白、核酸发生 SPAAC 反应,实现对目标生物分子的深红色荧光标记,通过激光共聚焦显微镜、宽场荧光显微镜观察其亚细胞分布和动态变化,如细胞膜受体的内吞、细胞骨架的组装、线粒体的动态运动等,且由于其光稳定性良好,可进行数小时的长时间动态成像,清晰捕捉生物分子的动态过程。
在免疫检测中,该探针可通过 CuAAC 反应与炔基修饰的抗体、二抗共价偶联,制备 AF594 标记的荧光抗体,用于免疫荧光染色(IF)、流式细胞术(FCM)、免疫组化(IHC)等实验,标记后的抗体荧光信号强、特异性高,在流式细胞术中可实现单细胞水平的精准定量,在免疫组化中可实现组织切片中靶蛋白的清晰定位;在核酸标记中,可对炔基修饰的 DNA/RNA 探针进行荧光标记,制备 AF594 核酸探针,用于荧光原位杂交(FISH),实现染色体、细胞内靶核酸的深红色荧光定位;在活体成像中,由于其深红色荧光在生物组织中的穿透性优于绿色、橙黄色荧光,可用于小鼠、斑马鱼等模式生物的浅层组织成像,如皮肤、肿瘤表层、血管的荧光标记和追踪。
此外,该探针还可用于纳米材料的荧光修饰,与 DBCO 修饰的金纳米颗粒、量子点、脂质体发生点击化学反应,制备红色荧光纳米探针,用于靶向药物递送的示踪和纳米材料的生物分布研究。AF594 N3 需在避光、-20℃干燥条件下储存,保存于棕色冻存管中,避免光照和反复冻融,有效期可达 12 个月以上;使用时用 DMSO 或无菌水现配现用,配好的工作液需避光保存,4℃下可短期存放。进行活细胞标记时,需根据细胞类型调整探针的孵育浓度(通常为 1-10 μM)和孵育时间(15-60 min),孵育后用 PBS 充分清洗细胞 3-5 次,去除未结合的探针,减少非特异性荧光;多色荧光成像时,需搭配 AF594 专用的激发和发射滤光片,避免与其他荧光团的光谱串色,保证成像结果的准确性。
产地:西安
规格:50mg 100mg 500mg
纯度:95%
状态:固体/粉末
储藏条件:冷藏
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

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